Схема шаль фрея: Вязаная шаль Фрея из пряжи Лимбажу. Работа Александры Миличенко

Как связать шаль из мохера

Мохер — разновидность пряжи, изготовленная из шерсти ангорской козы. Волокна этих шерстяных ниток очень длинные и пушистые, что придаёт вязаным изделиям мягкость и воздушность.

Из мохера можно создать палантин, шаль, плед, покрывало и другие тёплые вещи. Также пряжа отлично подойдёт для вязания ажурных изделий, свитеров, костюмов, платьев, шапок, шарфов — самой разной одежды.

Отличия мохера от других видов пряжи

Мохеровая пряжа имеет очень пушистый ворс. Однако её очень легко перепутать с ангорой, в составе которой содержится кроличья шерсть. Несмотря на то, что эти виды пряжи очень похожи, есть пара важных моментов. Ангора отличается длинным и более пушистым ворсом, что делает эту нить менее качественной. А мохер гораздо прочнее чем пряжа из кроличьей шерсти и на порядок дороже.

Прочным мохер становится за счёт добавления в состав акрила или овечьей шерсти. Тем не менее нить не теряет своей шелковистости. Важно отметить, что содержание козьей шерсти в пряже не должно превышать 82% – это говорит о качестве продукта.

Ниже перечислены свойства мохеровой пряжи, которые помогут убедиться в её качестве:

Свойства:

• нити не перекручиваются в процессе вязания;
• мягкость и шелковистость;
• износостойкость;
• тонкая нить;
• не сваливается;
• устойчива к загрязнениям;
• гипоаллергенна.

Специфика вязания

Рукодельницы предпочитают вязать мохеровой пряжей, потому что она очень податлива. Существует несколько правил, которые помогут приручить этот материал:

1. Необходимо выбирать спицы, которые соответствуют размеру нити. Мохеровая пряжа довольно тонкая, соответственно, инструмент тоже должен быть меньшего размера.
2. Независимо от плотности вязки изделие будет прозрачным, но тёплым.
3. Хорошо натянутая нить — залог качественного изделия, которое будет держать форму гораздо дольше.

Правила ухода за вещами из мохера

1. Вещи из мохера можно стирать в стиральной машине в режиме для шерстяных изделий.
2. Одежда из шерсти практические не мнётся, поэтому её можно хранить в шкафу.
3. Следует иногда проветривать шкаф.
4. Не рекомендуется сушить на батарее и других приборах: вещь из мохера должна сохнуть при комнатной температуре.

Вязание из мохера, модели с нашего сайта

Платье – ампир, связано спицами

Платье связано из пряжи NAKO Mohair Delicate (500м100 гр)- понадобилось 300 гр, и пряжи Pelikan – (330м50 гр) – 75 гр, сп. 3,5, 4, 5 Для желающих связать прикладываю описание – оригинал, поэтому там указана другая

Женский джемпер, вязание спицами

Джемпер из тончайшего кид мохера Kid seta super 210м25 гр. На размер 46 понадобилось 4 с небольшим мотка, спицы 3 – основное полотно и 2.5- резинка. В описании вязания спинка удлиненная, меня попросили связать ровную спинку.

Кофточка Лесные пролески

Кофточка – вязание из кид-мохера “Лесные пролески”. Пряжа Camelot Lineapiu-стоковый мохер на бобинах Состав: 70% cупер кид мохер, 30% ПА, 1000 м / 100 г, цвет ультрамарин, много бисера №6, цвет синий перламутр. Спицы бамбуковые круговые №3,5, крючки

Палантин, вязание из мохера

Пряжа Alize KID ROYAL, 62% кид мохер, 38% полиамид, 50 г,/500 м,(ушло 60г) прозрачный голубой бисер, спицы №3,5, крючок №2 размер палантина 70см на 190см Условные обозначения схемы узора “листики” Черный квадрат-

Вязанный спицами палантин

Нежный, легкий как паутинка, теплый и воздушный модный палантин связан из тончайшего мохера на спицах. Размер палантина: 70*180 см. Для вязания палантина вам потребуется: 125 г мохеровой пряжи (80 % супер кид мохер, 20 % полиамид,

Как связать спицами шапочку Такори

Автор galina.g.knit (Инстаграм). Пряжа Ализе Мохер классик Спицы круговые номер 7 Вяжу в две нити. Набираю самым простым способом 50 петель + 1 для соединения. Замыкаю в круг и вяжу полупатентную резинку по кругу на высоту 40-42

Женская юбка с воланами

Такие пышные юбки настоящий тренд сезона. Вам осталось только подобрать длину по вкусу. Размер юбки 48. Вам потребуется: 500г пряжи серого цвет для основы юбки (70 % шерсть, 30 % акрил, 400 м х 100г), 200 г

Вязаный спицами палантин Barnaba

Ажурный палантин “Barnaba” Barnaba Shawl pattern by Denise Bartels схема в свободном доступе, связан и Итальянского кид-мохера MISTER JOE art OXFORD, цвет оливковый, метраж 900 м/100г, размер палантина 170 х 70 см. Схемы и описание палантина

Женская кофточка спицами

Кофточка связана из мохера Nako 40% мохер, 60% акрил в (100 гр./500 м). Узор: кратно 8 + 1 для симметрии + 2 кромочные. 1-й р.( 1 л., 2 вместе перекидом, 1 лиц, 1 накид,1 л.п., 1 накид,1

Ажурный палантин связан из мохера

Ажурный палантин. Очень теплое, воздушное, женственное изделие. Вяжется легко и быстро. Для выполнения работы использовала мохер YarnArt производства ТУРЦИИ, 100 гр- 520 метров, спицы №4,5. Длина 180, ширина 50 см. На данный размер ушло 1,5

Как связать топ с цветочными мотивами

Размер топа: 40-42. Для вязания вам потребуется: 50 г пряжи корал­лового цвета (80% супер кид мохер, 20% полиамид, 250 м х 25 г), круговые спицы № 3, крючок № 2,) и 100 г хлопка с вискозой

Ажурное платье спицами

Размеры платья: 34/36 и 40/42. Материалы: пряжа Karen Noe “Mercerisiert bomuld 8/2″ (100% мерсеризированный хлопок, 335 м/50 г) – 150 (200) г лилового цвета № 376, пряжа „Super Kid Mohair” (80% супер кид мохер, 20%

Свитер с воротником Хомут

Свитер с воротником ” Хомут”. Выполнен из королевского мохера, спицы № 3,0-3,5. Раннее , я уже представляла модель с аналогичным узором. Модель изменена, а узор остался. Очень уж он мне понравился. Легко вяжется и смотрится

Палантин спицами, вязание из мохера

Палантин связан из пряжи АЛИЗЕ Кид Роял (25 гр -250 м) , 62%-кид мохер, 38% -полиамид. Спицы №5, потребовалось 3 моточка. Размер палантина 55см х 200см. Раппорт узора состоит из 9п +2 +2 кромочные. Я

Желтый свитер спицами

Добрый день, мастерицам и любителям вязания. Предлагаю Вашему вниманию изделие связанное из королевского мохера жёлтого цвета. В состав пряжи входит: 90% мохер, 10% нейлон. Длина нити 200 м/50 гр. Спицы номер 3. Ажурный узор ” Колосья”

Вяжем красивые и теплые вещи, идеи из интернет

Кардиган Rose спицами связан

Легкий кардиган в форме кокона.
Подойдет для любого уровня вязания.
Вяжется единым полотном с дальнейшей обработкой краев. Автор описания Ver Croveriya.

Размер изделия: 42-44 (46-48).
Для других размеров расчет проведите самостоятельно.

Пряжа: YarnArt Angora de lux (70% мохер, 30% акрил) 520 м / 100 г. На размер 42-44 ушло 115г (чуть больше 1 мотка). Этот мохер достаточно колкий. Есть возможность взять помягче, берите другой.

• спицы 4 мм
• трикотажная игла (игла с тупым концом)
• дополнительная нить для открытого наборного края.

Палантин Прохлада связан спицами из мохера

Автор описания Ulliko Tairova.

Палантин вяжется от середины, в противоположные стороны.

Для вязания палантина вам потребуется:

1. Нитки 1000-1500м в 100 гр. (примерно 100 гр.), желательно с наибольшим содержанием натуральных волокон ( мохер, лён, шёлк, хлопок, тонкая шерсть)
2. Спицы ном 2, 2,5 или 3 ( в зависимости от размаха вашей руки), рекомендованные вашим ниткам.
3. Маркеры – 2 шт.
4. Крючок для закрытия – 2,5.
5. Крючок для бисера – 0,5
6. Бисер в палантине не предусмотрен, но по желанию можно в кайме заменить нупы на бисер.

Вязанные спицами варежки Принцесса из мохера

интересная подборка на knitka.ru Ажурные Шапочки для Девочки 22 модели только для девочек

Зима — время любимых праздников, душевных подарков, уютных нарядов для приятных прогулок по заснеженным улицам. Сегодня в рамках совместного проекта со Swarovski мы представляем актуальный мастер-класс, который поможет своими руками создать красивый аксессуар для вашего зимнего образа.

Татьяна Олейник — амбассадор Swarovski Create Your Style — подготовила подробное описание, пошаговые инструкции и схемы по вязанию роскошных и теплых варежек.

Чтобы связать варежки размера 7-8 вам понадобится:

1. 50 г пряжи кид мохер с шелком;
2. спицы №3,5;
3. крючок №0,5;
4. кристальные бусины Swarovski®, 4 мм, артикул 5328 — 14 шт.;
5. кристальные бусины Swarovski®, 11 мм, артикул 5541 — 4 шт.;
6. бросовая нить.

Шаль Маори спицами из мохера, дизайнер Дарья Сорокина

Маори – это классическая шаль треугольной формы, которая вяжется от центра сверху вниз одной деталью. Шаль формируется из двух идентичных треугольников с центральной петлей по середине и с 3 кромочными петлями в начале и конце каждого ряда. Рисунок формируется только в лицевых рядах.

Пряжа: можно использовать любую тонкую пряжу на ваш выбор, которая подойдет для шалей и которая хорошо держит форму после блокировки (например, 100% шерсть). Автор использовала – 55 грамм (500метров) мохеровой пряжи Codore (900 метров/100г).

Спицы: размер спиц зависит от вашей индивидуальной плотности вязания. Данная шаль связана спицами 2,75 мм (но вяжу слабо).

Итоговый размер шали: 175 x 80 см (после блокировки).

Схемы и описание шали на русском бесплатно вы можете скачать по ссылке.

Дизайнерский топ спицами из мохера

Мастер – класс этого топа опубликовала Lanabysvetlana с Ярмарки Мастеров.

Для вязания топа она использовала:

• кид мохер на шелке (100 г — 800 м) в 2 нити;
• меринос 80%, кашемир 20% (100 г — 400 м) в 1 нити.

На топ размером 42-44 (длина 55 см, ширина 45 см) потребовалось 125 г кид мохера и 100 г мериноса с кашемиром.

Очень важно! Перед тем как приступить к вязанию топа, необходимо связать образцы, чтобы подобрать правильный номер спиц, сделать расчеты в соответствии с вашей плотностью вязания и посмотреть, понравится ли, как выглядит выбранная пряжа в данном узоре.

Использовала спицы № 4,5 для вязания резинки и № 5,5 для вязания основного полотна и оборок. Моя плотность вязания ажурного узора составила 16 п. х 20 р. = 10 см х 10 см.

Подробный мастер – класс смотрите по ссылке

Джемпер на круговой кокетке связан спицами

Описание и схемы вязания

Размеры: S/M и L/XL.
Длина: 59,5 и 65.5 см.
Пряжа средней толщины (Worsted weight, №4 Medium).
Модель связана из пряжи Permin Angel (70% кид мохер, 30% шелк; (210 м/25 г), цвет powder (пудра) 004, 3 (3) мотка.
Круговые спицы 4.5 мм, длиной 60 см и 80 см для размера.
S/M; 5 мм, длиной 60 см и 80 см для размера L/XL.
Дополнительно: маркеры для петель, гобеленовая игла.

Вязаный джемпер из мохера

Ажурная шапочка и снуд из мохера

Размеры шапочки: S/M — M/L ( по окружности 54/56см — 56/58 см, в высоту – 25-27 см)

Размеры снуда: S/M — M/L (по окружности 70-80 см, в высоту 35-40 см).

Материалы для вязания шапки: 1 моток (25 г) пряжи DROPS KID-SILK от Гарнстудио (200 м на 25 г, по составу 75% мохера, 25 % шелка), цвет № 11 (лаванда) – для всех размеров, круговые спицы 3,5 мм длиной 40 или 60 см, а также круговые спицы толщиной 2,5 мм (длиной 40 см) для вязания резинки.

Видео уроки по вязанию изделий из мохера

Вяжем шапку Такори из мохера с отворотом

Здесь должно загрузиться видео, подождите или обновите страницу.

Как связать спицами шапочку из мохера английской резинкой

В этим мастер-классе я вязала модную шапку английской резинкой по кругу (без швов) из мохера

Важно! количество петель должно делится на 4, но это еще не все, в 1/4 части количество петель должно быть четным, ( например 54/4 =14 (четно число), в противном случае необходимо будет делать индивидуальный расчет и вязание макушечки будет немного отличаться

Здесь должно загрузиться видео, подождите или обновите страницу.

Пошаговое описание палантина из мохера

Палантин связан из итальянского мохера на шелке Soft Dream BBB (75% мохера, 25% шелка; 25г р/200 м). Расход 2 моточка. Спицы № 4.

Здесь должно загрузиться видео, подождите или обновите страницу.

Палантин из журнала Filati Home №72 2019

Filati Home №72 2019

Серая шаль из мохера

Серая шаль из мохера. Пряжа Glamour 55% кид мохер, 15% шерсть, 30% ПА, 1500 м/100 г) – 100 г серого цвета, круговые спицы №5,5.

Ажурная шаль с рукавами из мохера

О, это и практично, и красиво, и удобно! Ажурная шаль с рукавами из мохера смотрится просто потрясающе – воздушно и при этом тепло.

Шаль «Султан» из мохера.

Изысканная шаль из мохера «Султан». Нежный ажурный узор. Вязание спицами. На заказ – 44 цвета + бесплатная доставка!

Размер: размах 150 см, высота 100 см.

Рекомендуемый уход: ручная стирка, 30 градусов, без отжима. Сушить в горизонтальном положении, предварительно расправив по рисунку.

Треугольная шаль «Харуни»

Воплощение одной из шалей Энгельна – «Харуни». Классический узор из лепестков + тонкий мохер. Множество цветов на выбор! И бесплатная доставка. Аккуратная треугольная шаль. Можно носить, как бактус.

Размер: размах 160 см, высота 95 см.

Рекомендуемый уход: ручная стирка, 30 градусов, отжим без выкручивания. Сушить в горизонтальном положении, предварительно расправив по рисунку.

Шаль с цветочным рисунком «Клематис»

Роскошная шаль из мохера «Клематис». Закругленной формы с интересным цветочным рисунком. Бесплатная доставка!

Рекомендуемый уход: ручная стирка, 30 градусов, отжим без выкручивания. Сушить в горизонтальном положении, предварительно расправив по рисунку.

Вязаная шаль «Холден» из мохера.

Простая и нежная шаль «Холден» из мохеровой пряжи.

Размер: размах 166 см, высота 73 см.

Рекомендуемый уход: ручная стирка, 30 градусов, отжим без выкручивания. Сушить в горизонтальном положении, предварительно расправив по рисунку.

Шаль из мохера. Вязание спицами.

Вязаная спицами большая треугольная шаль. Тонкий, мягкий мохер – не колется, приятный на ощупь.

Доступно 44 цвета на выбор. Бесплатная доставка.

Размер: размах около 265 см, высота 125 см.

Вес: около 85 гр.

Рекомендуемый уход: ручная стирка, 30 градусов, отжим без выкручивания. Сушить в горизонтальном положении.

Шаль из мохера «Фрея»

Большая круговая шаль из мохера «Фрея». Нежная и сказочная!

Доставка- бесплатно, на заказ – 44 цвета.

Размер: радиус около 50 см

Вес: около 100 гр.

Рекомендуемый уход: ручная стирка, 30 градусов, отжим без выкручивания. Сушить в горизонтальном положении.

Шаль спицами «Воздушные шары»

Шаль, вязаная спицами из тончайшего мохера «Воздушные шары»

Доступно 44 цвета на выбор. Бесплатная доставка.

Треугольная шаль, размах 190 см, высота 80 см.

Рекомендуемый уход: ручная стирка, 30 градусов, отжим без выкручивания. Сушить в горизонтальном положении.

Треугольная шаль

Шаль Mantilla от дизайнера Jean Moss

Шаль Mantilla от дизайнера Jean Moss

Нежная шаль подойдет романтичным девушкам и женщинам. Станет украшением платья или костюма.

Размер: 56 см х 112 см

Плотность вязания: 20 п х 26 р = 10 х 10 см

Вам потребуется: 3 мотка (75 г) пряжи Rowan Kidsilk Haze (мохер), длинные круговые спицы 4.5 мм, маркеры.

Палантин из мохера

Палантин связан из тонкого мохера. 25гр/225м. Размер 90 на 170 см. Вес 125гр. Ширина на 118 петель.

Серая шаль из мохера

Серая шаль из мохера. Пряжа Glamour 55% кид мохер, 15% шерсть, 30% ПА, 1500 м/100 г) – 100 г серого цвета, круговые спицы №5,5.

Шаль «Крокодил» из мохера.

Шаль «Крокодил» из мохера.

Лучший стиль, лучший мохер и лучший цвет . Вы будете любить носить эту шаль.

Эта классическая шаль из мохера вяжется быстро. Идеально подходит для выходных на природе, поездок, и может быть потрясающим дополнением к свадебному наряду невесты или подружек. Вы можете носить этот классический платок, как шарф, капот или накидку. Цветочный дизайн добавляет изысканности и шарма. Эту конструкцию можно носить с любой ансамбль вы хотите. Независимо от вашего настроения или повод. Элегантный и сексуальным с платьем или брючным костюмом. Шаль придаст наряду особый стиль и будет востребована, как аксессуар гардероба, в течение года.

Понадобится:

Небрежно накинутая на плечи ажурная шаль создает мягкий образ. Размер: 70 х 177 см.

Описание модели

Размер: 70 х 177 см Вам потребуется: пряжа (77% мохера, 23% шелка; 175 м/25 г) – 200 г цв. розового дерева: спицы № 4 или 4,5. Узор 1: ажурный узор из ромбов (число петель кратно 20 + 5 + 2 кромочные) = вязать согл. схеме 1. На ней даны лицевые и изнаночные ряды. Начать с 1 кромочной и петель перед раппортом, раппорт постоянно повторять, закончить петлями после раппорта и 1 кромочной Постоянно повторять 1-20-й ряды.

Узор 2: зубчатый ажурный узор (вначале на 18 петель) = вязать согл. схеме 2. На ней даны лицевые и изнаночные ряды, включая кромочные. Постоянно повторять 1-20-й ряды В связи с особенностями узора число петель варьирует.

Плотность вязания: 21 п. х 26 р. =10×10 см.

Описание работы: набрать на спицы 147 петель и вязать узором 1. Через 177 см = 460 рядов от начального ряда закрыть все петли. Зубчатый бордюр (2 детали): набрать на спицы 18 петель и вязать узором 2. Через 69 см = 180 рядов от начального ряда закрыть все петли.

Сборка: зубчатые бордюры левым боковым краем пришить к начальному и последнему ряду платка.

Новые схемы

Подпишитесь на рассылку и узнавайте о новых схемах первыми!

схема и мастер класс по вязанию

Сегодня мы покажем вам как вязать шаль, но не простую треугольную, а трансформер, которую несложными манёврами можно превратить в жилетку, красивый шарф, кофту, тунику и многое другое, всё будет ограничиваться только вашим воображением! Заинтересовало? Тогда приступим.

Необходимые материалы

• Желание вязать и свободное время
• Крючок
• Спицы третьего номера
• Прядь нити, желательно натуральной 500-600 грамм
• Вязальные маркеры и булавки
• Фантазия, проявив которую шаль можно дополнить, тем самым создав ещё несколько вариантов трансформации.

СХЕМА ВЯЗАНИЯ

Шаль трансформер можно связать в любом узоре, будь то листья, ракушки, капельки или любой другой, в связи с этим схема шали представляет собой только её форму, а сам узор можно использовать абсолютно любой.

Вот, к примеру, возьмём эту схему и вяжем по ней, но по обеим сторонам делаем прорези для рук.  Кроме того, в основу шали трансформер можно использовать уже готовую, всё что вам нужно это изготовить удобные прорези для рук.
Можно сделать нескольких видов, или просто изменить уже готовый вариант, к примеру вместо прорезей для рукавов, можно сделать воротник по центру и шаль будет надеваться на шею как полноценная кофта. В общем, проявив фантазию, можно сотворить абсолютно уникальную вещь и удивить ею окружающих вас людей.
Вот  несколько вариантов таких трансформаций:

В видео можно наткнуться на пошаговую инструкцию, специально подготовленную для определённого узора и размера шали, найти несколько интересных трансформаций и их описание.

Шаль Холден — схема и описание спицами

Сегодня у нас урок по вязанию спицами интересной шали Холден. Это простой, но практичный и красивый аксессуар, который пригодится в зимний или весенне-осенний период. Свои объяснения я постараюсь делать достаточно подробно, как для начинающих.

Шаль Холден – схема и описание вязания

Дизайн Migdi Wikes
Эта шаль вяжется в виде треугольника, начиная от центра верхней самой длинной стороны (верхом будем называть ту часть, которая будет одеваться на шею, низ – угол).

Длина: 140 см на 65 см.
Плотность: 18 п. = 10 см

В оригинале использована пряжа Malabrigo Yarn Sock (100% мериносовая шерсть, 400мет/100гр), спицы № 4. Но вы можете выбрать и другую толщину нити. Если пряжа будет более толстая, то изделие получится плотнее и теплее, для холодного времени года. Можно связать шаль Холден и из тонких мохеровых ниток. Например, 700мет/100гр. Тогда стоит взять спицы № 2 или № 3.

Внимание: 3 п. в начале и конце всех рядов вяжите лицевыми петлями. Эти петли и центральная п. не обозначены в схеме. Приведена только половина шали.

Описание вязания шали Холден спицами:

Наберите 3 п. и свяжите 6 р. платочной вязкой. Провязав последний ряд, не переворачивайте работу.

Наберите 3 п. и свяжите 6 рядов лицевыми петлями

По левой стороне полученного (на фото выше там, где красная стрелка) прямоугольника наберите 3 п. и провяжите их лицевыми.

По длинной стороне под углом 90 градусов наберите еще 3 п. (на спицах 6 п.

Затем поднимите по короткой стороне прямоугольника еще 3 п. (на спицах 9 п.).

Сейчас на спицах 9 п.

Начало: часть без ажурного узора

Кромочные вязать не нужно, первую и последнюю петли провязывайте лицевыми.

Центральная полоска будет симпатичней и ярко выраженной, если в лицев. р. вы будете провязывать центральн. п. на 1 ряд ниже (по желанию).

Далее вяжите по аналогии до необходимого размера, делая накиды после первых 3-х п., до и после централ. п. и перед завершающими 3-мя лиц. петлями в лицев. р. Изнаночные р. выполняйте как 5 р.

По приведенной схеме бактус Холден возможно связать любого объема от среднего до огромной накидки. Но чтобы схема каймы совпала с неажурной частью шали, необходимо посчитать петли МЕЖДУ НАКИДАМИ после первых 3-х п. и перед центральной п. Это число должно делиться на 13.

Описание каймы для шали Холден:

Чтобы кайма получилась пышнее и воздушнее, можно поменять спицы на полномера побольше (но это необязательно, каждая мастерица решается для себя сама).

Далее повторяйте аналогично с 1-го по 8 р. Но в связи с тем, что в каждом лицев.р. мы делали накиды и количество петель в следующих р. стало больше (дополнительные петли после кромки в начале р., перед и до центр.п., до кромки в конце р.). Их провязывайте лиц.п.

Количество раппортов в длину вы определяйте сами. Можно связать 2, 3, 4, 5… Чем больше, тем длиннее и ажурнее получится вязаная шаль.

Схема половинки накидки:

На схема представлена только половина шали, вторая половинка вяжется симметрично. На схеме нет крайних 3-х петель и центральной петли.

В конечном раппорте вы можете выполнить все р. , а так же можно не вывязывать последние два р. Так финишный край получится эффектнее.

Видео мастер класс от  канала  PatrikeiYA:

Госпиталь Сент-Луис Парк вошел в историю здравоохранения — Sahan Journal

Sahan Journal публикует статьи о цветных сообществах Миннесоты, которые вы больше нигде не найдете.

Подпишитесь на нашу бесплатную рассылку новостей, которая будет доставлена ​​вам на почту.

Обработка…

Успех! Вы в списке.

Ой! Произошла ошибка, и мы не смогли обработать вашу подписку.Пожалуйста, обновите страницу и попробуйте еще раз.

Sahan Journal публикует подробные репортажи об иммигрантах и ​​цветных сообществах Миннесоты и об иммигрантах из Миннесоты — такие истории вы не найдете больше нигде. Получите их в свой почтовый ящик.

Обработка…

Успех! Вы в списке.

Ой! Произошла ошибка, и мы не смогли обработать вашу подписку. Пожалуйста, обновите страницу и попробуйте еще раз.

Помогите нам продолжать освещать реальные новости об иммигрантах и ​​беженцах Миннесоты.Сделайте пожертвование сегодня в рамках Дня максимума. Когда вы делаете пожертвования сейчас, NewsMatch щедро совмещает пожертвования доллар за долларом — до 1000 долларов — нашей некоммерческой редакции. Дай сейчас.

ST. ЛУИ ПАРК — За 10 лет работы волонтером в методистской больнице Хилал Ибрагим заметила, что некоторые пациенты покрывали голову больничными одеялами. Хиджаба не было в больнице, поэтому пациенты придумывали свои собственные решения.

«Я помню, как у кого-то начались схватки, и они были очень быстрыми», — вспоминает она.«В тот момент ты уже уязвим. Представьте, что у вас нет предмета скромности или того, к чему вы привыкли ».

В четверг компания Хилала Henna & Hijabs запустила новую линию головных платков для пациентов и персонала методистской больницы, которая стала первой в стране, кто носит хиджабы в своем магазине подарков.

«Мы очень рады стать первым поставщиком медицинских услуг в стране, который будет принимать что-то такого масштаба», — сказала Анахита Камерон, главный специалист по кадрам HealthPartners, которая управляет методистской больницей.

Дженнифер Мистер, президент больницы Сент-Луис Парк, сказала, что первое в своем роде партнерство стало результатом того, что «многие люди сказали« да »в нужное время» после того, как Хилал выдвинул идею.

Хилал, 24-летний генеральный директор Henna & Hijabs, который также работает сейчас в больнице флеботомистом, сказал, что шарфы предназначены не только для мусульманских женщин, но и для всех, кто ценит скромность.

Она сказала, что разработала головные платки, чтобы они также подходили для онкологических больных, проходящих химиотерапию.

Хиджабы, изготовленные из трикотажа с «дышащей эластичностью», также разработаны с учетом потребностей медицинского персонала.

Хотите больше? Получайте новости и истории, которые освещают жизнь и опыт иммигрантов Миннесоты и цветных сообществ.

Обработка…

Успех! Вы в списке.

Ой! Произошла ошибка, и мы не смогли обработать вашу подписку. Пожалуйста, обновите страницу и попробуйте еще раз.

«Шифоновый шарф плохо держится, когда вы берете кровь у пациентов или вставляете капельницы», — сказал Хилал. «Обычно, когда я выбираю свой шарф, я могу носить его в спортзале и в больнице».

Платки в сувенирном магазине соответствуют цветовой гамме больницы, что помогает с униформой персонала, сказал Мистер.

Кэмерон назвал партнерство «детищем Хилала».

«Она увидела необходимость и оказалась на высоте», — сказала она. «Мы очень рады поддержать местный бизнес, принадлежащий женщинам, управляемый женщинами, в городах-побратимах и создать действительно инклюзивную и разнообразную среду для пациентов, участников и членов нашей команды.”

Мистер, который стал президентом больницы в прошлом году, сказал, что Хилал также помог больнице удовлетворить духовные потребности мусульманских пациентов и теперь помогает родильному центру удовлетворять разнообразные культурные потребности во время родов.

«Она во многом повлияла на нашу культуру», — сказал Мистер.

Кэмерон сказала, что она гордится работой HealthPartners по созданию «гостеприимной, инклюзивной среды, в которой каждый чувствует себя ценным». По ее словам, сфера здравоохранения должна внести свой вклад в уменьшение неравенства между различными группами населения.

«Мы можем сыграть огромную роль в устранении диспропорций, поскольку они связаны с различиями всех видов», — сказала она. «Надеюсь, это станет прецедентом, поскольку другие последуют их примеру и будут искать способы сделать свою систему здравоохранения более инклюзивной».

Для Хилал «по-настоящему особенным» увидеть ее линию хиджабов в сувенирном магазине, где она начала волонтерство 10 лет назад.

«Я надеюсь, что это вдохновит другие больницы на аналогичные инициативы, чтобы действительно охватить различные группы пациентов», — сказала она.«Я думаю, что это отличная основа, на которую могут обратить внимание другие больницы».

Sahan Journal публикует подробные репортажи об иммигрантах и ​​цветных сообществах — такие истории вы не найдете больше нигде. Мы не прячем нашу ориентированную на сообщество отчетность за платным доступом: мы хотим, чтобы это было бесплатно для всех. Но такая журналистика стоит дорого, и мы не сможем выполнить эту важную работу без вашей помощи. Вот почему мы полагаемся на щедрость таких читателей, как вы, в поддержке нашей некоммерческой службы новостей.

Станьте ежемесячным донором сегодня, чтобы помочь нам продолжать предоставлять отмеченные наградами отчеты нашему сообществу. Спасибо.

Помните лорда Эдмура и Хауса Талли?

(предупреждение о спойлере: Не читайте, если не видели эпизод «Игры престолов» на этой неделе)

В первые три сезона «Игры престолов» Дом Талли был главным игроком в Войне престолов. Они были главными союзниками Робба Старка, так как его мать, Кейтилин, происходила из их дома. Среди главных воинов в доме Талли был брат Кейтилин, Эдмур, упрямый парень, которого Робб призвал жениться на Рослин Фрей в попытке укрепить союз между двумя домами в войне.

Этот брак оказался Красной свадьбой.

После той свадьбы и последовавшей за ней смерти Робба и Кейтилин, Дом Талли в основном не фигурировал в сериале. Но в эпизоде ​​этой недели семья Кейтилин вернулась в виде двух членов: Эдмура и его дяди Блэкфиш.Поскольку эти двое мужчин, вероятно, станут ключевыми игроками в предстоящей битве между Старками и Рамси Болтоном за контроль над Винтерфеллом, пора нам заново познакомиться с ними.

Также читайте: Доказала ли «Игра престолов» теорию Бенджена Старка, бросив вызов книгам?

Собственное имя Черной Рыбы — сир Бринден Талли, и это человек, который бунтует в вопросах мира, но дисциплинирован в вопросах войны. Его старший брат и отец Кейтилин, лорд Хостер Талли, постоянно пытались устроить брак для Бриндена.Когда Бринден продолжал отказывать им, Хостер назвал его белой вороной в семье, на что Бринден сказал, что, поскольку их домашний символ — форель, они должны называть его «Черная рыба», отсюда и его прозвище.

Во время своих выступлений в третьем сезоне Блэкфиш быстро доказал, что является фоном для своего упрямого и эмоционального племянника Эдмура. Во время похорон лорда Хостера Эдмур неоднократно не мог поджечь его погребальную лодку пылающими стрелами.

Раздраженный Эдмуром на нервы, Бринден оттолкнул его и сам поджег лодку.В то время как Эдмур импульсивно атаковал участки Ланнистеров и стоил Роббу сотен человек, Бринден дал Роббу ценные советы о том, как действовать на войне … советы, которые молодой Старк иногда не прислушивался.

Также читайте: «Игра престолов»: Бран Старк стал причиной падения Безумного короля?

По иронии судьбы, именно Бринден, человек, отказавшийся от семейной жизни, убедил Эдмура принять участие в свадьбе, которая привела к почти разрушению их дома руками Фреев.Судьба распорядилась так, что именно мочевой пузырь Бриндена спас ему жизнь, когда он вышел на улицу, чтобы совершить прогулку, когда Уолдер Фрей приказал своим людям перебить всех. Тем временем Эдмур был доставлен в свои покои якобы на церемонию укладки постели с Рослин, но Фреи взяли его в заложники.

Позже Блэкфиш собрал все, что осталось от его дома, и дождался подходящего момента, чтобы нанести ответный удар. Уолдер Фрей, самоуверенный кретин, самодовольно отклонил тот факт, что Бринден сбежал, и злорадствовал по поводу того, как Эдмур провел свою брачную ночь в темнице из-за своего предательства.

Теперь Фрей расплатился за свое высокомерие, поскольку Бринден забрал обратно дом Талли, Риверран. Более того, Санса Старк знает об этом благодаря Мизинцу, и она послала Бриенну из Тарта найти Бриндена и попросить его помочь Джону Сноу уничтожить Болтонов и Фрейсов с Севера раз и навсегда.

Также читайте: «Игра престолов»: все, что Бран Старк видел в своем ретроспективном кадре «Кровь моей крови»

Уолдер Фрей, конечно, никогда не признает вины.В эпизоде ​​этой недели он устроил истерику из-за того, что его люди проиграли Риверран, и обвинил их в том, что они с самого начала позволили Blackfish сбежать с Красной свадьбы. Но у него все еще есть Эдмур в качестве заложника, и он планирует использовать его, чтобы противостоять возрождающемуся Дому Талли.

Старки и Талли борются с Болтонами и Фреями за контроль над Севером с начала 2-го сезона, и теперь эта битва готовится к критической точке. Но в конце концов есть шанс отомстить за смерть Робба и Кейтилин.

Кто побеждает в «Игре престолов»: 20 лучших рейтингов силы после 6-го эпизода (фотографии)

• Из-за отсутствия смертей и главных персонажей, таких как Джон, Санса и Тирион, в эпизоде ​​этой недели было немного сложно сформировать наш рейтинг силы в «Игре престолов». Тем не менее, в нижней половине рейтинга несколько персонажей были заменены другими, которые вернулись в центр внимания на этой неделе, а те, кто занимался делами в Королевской Гавани, либо взлетели в наш список, либо сильно упали, в зависимости от того, очень увлечены работой Faith Militant с Crown.

  Посмотреть рейтинг за прошлую неделю можно здесь

  HBO

• ВЫПАДАЮЩИЕ ИЗ РЕЙТИНГОВ:

  Кинвара, Варис, Оленна Тирелл, Теон Грейджой

  HBO

• 20. ) Уолдер Фрей (Рейтинг на прошлой неделе: без рейтинга) Отсутствие Рамзи приводит к избытку желчи? Не волнуйтесь, мерзавец, спланировавший Красную свадьбу, вернулся, и он планирует использовать Эдмура Талли, чтобы отбить Риверран у Черной Рыбы.Пока меч, наконец, не пронзит холодное черное сердце Уолдера, он получит место в нашем рейтинге.

  Читайте также: «Игра престолов» 101: Помните лорда Эдмура и Хауса Талли?

  HBO

• 19.) Сэмвелл Тарли (NR) — Извини, папа Тарли. У вашего сына больше смелости, чем вы думаете. Как Феррис Бьюллер и Кэмерон Фрай, крадущие Феррари, Сэмвелл и Джилли украли великий валирийский меч Дома Тарли Heartsbane для использования против Белых Ходоков.Надеюсь, Сэм знает, как раскачивать эту штуку.

  HBO

• 18.) Бенджен Старк (NR) — Бран без его приятеля в супертяжелом весе и его лютоволка. Он ходячий мертвец, верно? Неа! Приходит его дорогой дядя Бенджен с пылающей булавой, чтобы спасти положение. У человека, также известного как Холодные руки, будет достаточно времени, чтобы догнать своего племянника, поскольку теперь ему предстоит подготовить Брана к битве с Белыми ходоками.

  Также читайте: Доказала ли «Игра престолов» теорию Бенджена Старка, бросив вызов книгам?

  HBO

• 17.) Серсея Ланнистер (10) — «Наши два древних дома рухнут из-за вашей глупости», — говорит Оленна Тирелл Серсее в превью к серии на следующей неделе. В самом деле, неудачная попытка Серсеи вернуть власть приводит к падению нашего рейтинга, и теперь ей приходится полагаться на Джейме, чтобы найти кого-то, кто сможет их выручить.

  HBO

• 16.) Давос Сиворт (13) — Давос теряет свою активность, поскольку на этой неделе он бездействует, но на следующей неделе он вернется, чтобы продолжить помогать Sansa готовиться к войне.

  HBO

• 15.) Бриенна из Тарта (18) — Бриенна в настоящее время направляется в Риверран, чтобы найти сира Бриндена Талли, как раз в то время, когда Фреи планируют закончить работу, которую они начали на Красной свадьбе. Бриенна потенциально держит судьбу Старков в своих руках, и ей, возможно, придется использовать и свой меч, и свои слова, чтобы вывести Черную Рыбу на Север, чтобы помочь Сансе вернуть Винтерфелл. Благодаря своей новой ответственности она поднялась в нашем рейтинге.

  HBO

• 14.) Джорах Мормонт (9) — Джорах отправился в неизвестные места, чтобы найти способ вылечить его оттенки серого. Может, он вернется в Миэрин и найдет помощь у Кинвары? Он должен действовать быстро.

  HBO

• 13.) Тирион Ланнистер (12) — Тирион не появлялся на этой неделе, поэтому нам еще предстоит увидеть, как именно он собирается продвигаться вперед теперь, когда вокруг Кинвара и освобожденные рабы в Миэрине становятся все более обиженными на него. Тирион сейчас идет по канату… но опять же… когда же он не такой?

  HBO

• 12.) Петир Бейлиш (14) — Несмотря на то, что Мизинец не появляется в этом эпизоде, Мизинец вскочил на пару пунктов, раскрывая на прошлой неделе, что Дом Талли возвращается. Оказывается, он не просто пытался задуть разъяренную Сансу. Он действительно давал ей информацию, которая могла означать разницу между победой и поражением.

  HBO

• 11.) Бродяга (11) — Бродяга посмотрела на Арью с презрением и дурацко ​​ударила ее посохом.Теперь ее вера в то, что Арья не подходит для приказа убийцы, оправдалась, и она заставит Арью заплатить за свою неудачу своей жизнью.

  HBO

• 10.) Арья Старк (16) — У девушки ДЕЙСТВИТЕЛЬНО есть имя! Арья поняла, что она не о той жизни Безликих, отказываясь убить назначенную ей цель и понимая, что даже такие монстры, как Серсея, заслуживают некоторого сочувствия. (И она категорически фанатка актрисы, играющей Серсею в спектакле в спектакле.Теперь у нее вернулась Игла, и она понадобится ей в ее предстоящей битве с Бродягой.

  HBO

• 9.) Яра Грейджой (5) — Яра все еще в бегах с Железных островов и отсутствовала на этой неделе. В следующем эпизоде ​​мы увидим, каков ее следующий шаг и как она планирует включить Теона и его желание отомстить Рамзи в свои грандиозные планы.

  HBO

• 8.) Джон Сноу (8) — Еще один праздный персонаж. Джон остается там, где он был на прошлой неделе, но в следующий раз мы увидим, как Джон наконец встанет и попытается сплотить одичалых для битвы с помощью Тормунда. После предательства Олли, возможно, некоторое доверие со стороны людей, которые, как ему однажды сказали, были его врагами, поможет Джону восстановить его боевой дух.

  HBO

• 7.) Маргери Тирелл (NR) — Разве не кажется странным, что Маргери внезапно стала так верна Верховному Воробью и Семерым после того, как она увидела, как она призывает Лораса продолжать борьбу? Нет, она точно знает, что делает.Мардж притворяется, что следует за Верховным Воробьем, чтобы защитить Лорас, при этом манипулируя Воинствующей верой, Ланнистерами и даже своей собственной бабушкой.

  HBO

• 6.) Эурон Грейджой (3) — Эурон получил высокие оценки на прошлой неделе за то, что взял под свой контроль Соляной Трон, но он будет медленно скатываться вниз в рейтинге, пока не нанесет ответный удар Яре за то, что тот захватил его флот. Ему может потребоваться время, чтобы накопить необходимые ресурсы.

  HBO

• 5.) Рамси Болтон (4) — Он снова пропадает вторую неделю подряд, но теряет лишь одно место из-за всей силы и зла, которые он накопил к этому моменту. Мы можем не увидеть Рамзи снова, пока они с Джоном не сразятся.

  HBO

• 4.) Бран Старк (6) — Да, похоже, что между силами Брана и безумием короля Эйриса устанавливается связь.Теперь, когда его давно потерянный дядя стал его наставником и опекуном, возможно, Бран действительно послушает своих старших на этот раз и использует свои силы, чтобы помочь сражаться с Белыми ходоками, вместо того, чтобы помогать им и позволять им убивать любимых фанатами персонажей.

  Читайте также: «Игра престолов»: Бран Старк стал причиной падения Безумного короля?

  HBO

• 3.) Санса Старк (1) — Санса простаивала на этой неделе, но потеряла лишь пару позиций, потому что ее решение отправить Бриенну в Риверран оказалось решающим. В серии на следующей неделе она вернется к заговору против Рамзи.

  HBO

• 2.) Высокий Воробей (7) — Казалось почти наверняка, что прогулка с покаянием Мардж закончится кровопролитием. Вместо этого Верховный Воробей с легкой ухмылкой закрывает переворот Ланнистеров. Теперь Томмен полностью на его стороне, но кто-то может захотеть проинформировать его об опасностях отказа от разделения церкви и государства.

  HBO

• 1.) Дейенерис Таргариен (2) — Некоторые могут устать от постоянных речей Дейенерис в раздевалке, но вы только посмотрите на Дрогона! Он выздоровел и стал еще больше, и если информация Тириона о драконах верна, Дрогон не перестанет расти. Возможно, наконец настало время для Дэни начать что-то делать.

  HBO

Предыдущий слайд
Следующий слайд

Верховный Воробей, Маргери и Арья продвигаются вверх в нашем рейтинге «Игры престолов», а Серсея Ланнистер терпит поражение.

Из-за отсутствия смертей и главных персонажей, таких как Джон, Санса и Тирион, в эпизоде ​​этой недели было немного сложно сформировать наш рейтинг силы в «Игре престолов». Тем не менее, в нижней половине рейтинга несколько персонажей были заменены другими, которые вернулись в центр внимания на этой неделе, а те, кто занимался делами в Королевской Гавани, либо взлетели в наш список, либо сильно упали, в зависимости от того, очень увлечены работой Faith Militant с Crown.

Посмотреть рейтинг за прошлую неделю можно здесь

Бюро находок — Kit Kemp

Бюро находок — Kit Kemp

Перейти к основному содержанию

Lost & Found — один из наших любимых дизайнов из коллекции Kit Kemp for Christopher Farr.Поскольку мы завершили этот дизайн ткани, мы хотели использовать его снова и снова, поскольку он принимает такие разные формы в зависимости от цвета, направления и применения.

Вдохновение для Lost & Found пришло из разговора о классическом хлопковом тикинге, который я нашел. Это так просто, но мне нравится структура и небольшие повторы, поэтому мы сохранили суть этого в пунктирной полосе и создали больше интереса с помощью повторяющихся квадратов. Как тканый материал с ценой 20 000 руб, он отлично подходит для обивки, но мы также использовали его для штор! Это также двойная ширина, что означает меньшее количество швов.

Библиотека Тиффани в отеле Ковент-Гарден

Мы использовали красный цвет в библиотеке отеля Covent Garden Hotel, проложив ткань вертикально в двух креслах. Это подчеркивает их стройную форму, делая их еще выше! Этот цвет очень хорошо сочетается со столярными изделиями из дуба красноватого оттенка, придавая комнате более серьезный и зрелый вид.

Номер 709 в отеле Crosby Street

Мы использовали зеленый цвет, чтобы обернуть прикроватный стул в номере 709 отеля Crosby Street. На этой плоской поверхности он выглядит супер-элегантно, а конструкция из ткани означает, что он прослужит долго.

Lost & Found настолько универсален, насколько это возможно при одновременном использовании в разных цветовых решениях. Например, мы использовали цветовую гамму индиго для двух кресел, стоящих у камина в одной комнате. Эти две расцветки дополняют основную ткань Пьера Фрея, которая задает цветовую схему для этой комнаты и вносит некоторые вариации, не вводя новых узоров.

Комбинации стульев

Мы немного повеселились, комбинируя Lost & Found с другими тканями для изготовления случайных стульев.

Для Bergdorf Goodman Lost & Found приобрела более причудливый вид с симпатичными вышитыми листьями и лепестками, разбросанными по передней части стула, и контрастным геометрическим изгибом вокруг спинки.

Шторы в отеле Crosby Street

Поскольку мы всегда стремимся к инновациям, мы использовали ту же ткань в шторах в люксе 609 в отеле Crosby Street Hotel, что придает комнате тонкое изменение текстуры и рисунка.Элегантный узор отлично сочетается с полосатыми обоями William Yeoward.

Принадлежности

Мы также с удовольствием придумывали аксессуары с использованием этого объемного плетения. Наша сумка для жизни демонстрирует дизайн Lost & Found в темно-синем цвете, напечатанный на 100% хлопке, и нам нравятся тканые шарфы и пледы с рисунком разных цветов.

Обратите внимание на наши новые подносы, также выполненные в дизайне «Потерянные и найденные», которые скоро появятся в Shop Kit Kemp.

Вернуться наверх

Наш веб-сайт использует файлы cookie, чтобы вам было удобнее. Продолжая просматривать наш сайт, вы соглашаетесь с нашей политикой использования файлов cookie.

Предпочтения
Принять и закрыть

Пополнено / Вышивка крестиком Tabeer Premium Lawn / LILLY FREY — 3 ШТ.

Марка

— Вышивка крестиком

Мы даем наложенным платежом только в Индии.

Клиенты по всему миру могут платить, используя международный безопасный платежный шлюз — Pay Pal \ Razor Pay

Вышивка крестиком Премиум газон 2021

100% оригинальные бренды

100% импортные бренды

3 шт. Несшитая ткань

Детали

РУБАШКА (2,5М)

ПЕРЕДНЯЯ ЧАСТЬ И РУКАВЫ ИЗ ГАЗОНА С ВЫШИВКОЙ

ЦИФРОВАЯ НАЗАД

ВЫШИВКА НА ПОД РУБАШКУ

БРЮКИ (2,5М)

БРЮКИ ИЗ КРАШЕННОЙ КАМБРЫ

ВЫШИВКА НА БРЮКИ

ДУПАТТА (2. 5М)

СЕТЬ RAJJO С ВЫШИВКОЙ DUPATTA

Обратите внимание —

1. Дополнительные кисточки Обвесы, оборки, кнопки, если они не упомянуты в качестве содержимого Пакета, не являются частью Пакета и предназначены только для демонстрации, которую Модель отображает в своей экипировке. Вы можете стилизовать свои несшитые костюмы, как модели, или сшить их в соответствии с содержимым, предоставленным с продуктами. Все пакистанские бренды демонстрируют лучший способ сшить свои наряды.

2. Фактические цвета могут отличаться.Это может зависеть от цветовой схемы вашего мобильного телефона / ноутбука или планшета, освещения фотосессии и т. Д.

3. Модели могут отображать Продукт в стилях, предназначенных только для демонстрации и моделирования. Ткань предоставляется только для прямой крой Shalwar Kameez, которая соответствует стандартным универсальным параметрам ткани

.

Уход за тканью —

1. Все ткани должны проходить химчистку — рекомендуется

2. Если вы стираете дома, следует использовать жидкости для мягких тканей.

3. Цветные ткани следует стирать отдельно

4.Ткани нельзя подвергать воздействию резкого солнечного света.

7. Машинная стирка не рекомендуется

Страница не найдена | MIT

Перейти к содержанию ↓

• Образование
• Исследовать
• Инновации
• Прием + помощь
• Студенческая жизнь
• Новости
• Выпускников
• О MIT
• Подробнее ↓
  • Прием + помощь
  • Студенческая жизнь
  • Новости
  • Выпускников
  • О MIT

Меню ↓

Поиск

Меню

Ой, похоже, мы не смогли найти то, что вы искали!
Попробуйте поискать что-нибудь еще!

Что вы ищете?

Увидеть больше результатов

Предложения или отзывы?

отсеков репликации вирусов ДНК | Journal of Virology

ФАБРИКИ ЦИТОПЛАЗМИЧЕСКИХ ДНК ВИРУСОВ

Ядерно-цитоплазматические большие ДНК-вирусы. Нуклеоцитоплазматические большие ДНК-вирусы (NCLDV) включают семь семейств крупных эукариотических ДНК-вирусов, которые инфицируют широкий круг хозяев, от водорослей до насекомых и млекопитающих: Ascoviridae, Asfarviridae, Iridoviridae, Mimiviridae, Phycodnaviridae, а также Poxviridae, недавно предложенные как семейство, которое включает Lausannevirus и Marseillevirus (6), все из которых обладают большим геномом от 150 до 1,2 Mb. Помимо общих нескольких основных генов, все они образуют сложные цитоплазматические RC, называемые вирусными фабриками, которые участвуют в репликации и сборке вирусов и, следовательно, демонстрируют динамическую архитектуру в цикле репликации вируса.Однако некоторые члены NCLDV реплицируются исключительно в цитоплазме, тогда как другие реплицируются в зависимости от времени как в ядре, так и в цитоплазме (7, 8).

РЦ поксвирусов и вируса африканской чумы свиней (АЧС) изучены более подробно и включены в недавние обзоры (4, 9). Подобно агресомам, которые образуются в результате клеточного ответа на агрегацию белков (10), вирусные фабрики NCLDV собираются в центре организации микротрубочек (MTOC), зависят от связанной с микротрубочками моторной динамики динеина, перераспределяют филаменты виментина в структуру, подобную клетке. и привлекают митохондрии, шапероны, убиквитин и протеасомы (4, 11) (рис.1).

Рис. 1.

Схема компартментов репликации ДНК-вируса, указывающая на локализацию в цитоплазме или ядре. В частности, показаны семейства вирусов Polyomaviridae, Papillomaviridae, Adenoviridae и Herpesviridae, а также NCLDV и автономные парвовирусы. Вирусные факторы и белки обозначены зеленым цветом, а клеточные — серым, при этом PML-NB, которые играют важную роль во время репликации Polyomaviridae, Papillomaviridae, Adenoviridae и Herpesviridae, показаны синим цветом.

Poxviridae. Poxviridae обладают необычным свойством репликации исключительно в цитоплазме. После слияния мембран и высвобождения в цитоплазму ядро ​​поксвируса транспортируется через микротрубочки (MT) к MTOC. Такой транспорт связан с перестройкой виментина и привлечением шаперонов и митохондрий к перинуклеарным сайтам, где в конечном итоге образуются компартменты репликации (12). Однако ранняя транскрипция гена уже инициируется внутри вирусного ядра вирусной ДНК-зависимой РНК-полимеразой (Pol) и вирусными факторами транскрипции, упакованными в вирусные частицы вместе с геномом. Таким образом, набор из примерно 100 ранних мРНК транскрибируется и впоследствии транслоцируется в цитоплазму, где, хотя они все еще связаны с МТ, они задействуются рибосомами для трансляции. Между тем вирусные ядра накапливаются вблизи шероховатой эндоплазматической сети (rER). В случае вируса коровьей оспы (VV), прототипа и наиболее изученного представителя Poxviridae, необходимы ранние белки, чтобы освободить вирусное ядро ​​и высвободить вирусную ДНК, как только вирусное ядро ​​достигнет ER (13). Этапы разборки для снятия оболочки генома зависят от убиквитин-опосредованной протеасомной деградации ранее убиквитинированных капсидных белков, и для репликации генома требуется убиквитинлигаза на основе Cullin3 (14).Геном, высвобождаемый из ядра, ассоциируется с набором вирусных белков, которые участвуют в репликации ДНК и организации предшественника RC (см. Ссылку 12), по мере того, как происходит репликация ДНК, накапливаются промежуточные и поздние мРНК, а также рибосомы и факторы трансляции. в расширяющихся фабриках ДНК (15), которые позже высвобождаются из rER, когда начинается сборка вириона (16, 17).

Поксвирусы кодируют более 130 белков, включая факторы, участвующие в транскрипции (18), включая более 20 вирусных белков, участвующих в синтезе РНК (см. Ссылку 19), а также репликации ДНК (см. Ссылку 20).Хотя они включают почти полный репертуар вирусных белков, ответственных за экспрессию вирусных генов и репликацию ДНК, обширная перестройка мембран ER, вероятно, будет рекрутировать и контролировать многие клеточные белки. Действительно, недавний скрининг РНК-интерференции выявил 188 клеточных факторов, необходимых для инфекции VV, включая как ядерные, так и цитоплазматические функции (14). В промежуточные и поздние периоды инфицирования синтез клеточного белка снижается (21–23), а клеточная мРНК разрушается под действием фермента, разрушающего вирусные клетки (24, 25).Кроме того, Poxviridae было предложено способствовать селективной и усиленной трансляции вирусных мРНК в исследованиях in vitro и (26). Очень сложные РЦ, окруженные ER, сравнивали с мини-ядрами, где вирусная ДНК, а также факторы транскрипции и трансляции заключены внутри мембранного компартмента. Однако, хотя недавно были продемонстрированы связанные транскрипция и трансляция (15), компартментализация вирусных фабрик приводит к разделению экспрессии генов и репликации генома, которые происходят в различимых субкомпартментах внутри или на поверхности вирусных фабрик.Кацафанас и Мосс показали, что транскрипция вирусной РНК происходит внутри фабрики, поскольку и вирусная РНК G8R, и поли (U) РНК локализованы в разных компартментах, которые эти авторы назвали полостями или туннелями вирусных фабрик. Более того, мечение поли (U) показало пониженное окрашивание цитоплазмы по сравнению с неинфицированными клетками, что согласуется с деградацией клеточной мРНК в промежуточные периоды инфицирования (15). Вирусный белок E3, связывающий дцРНК, который противодействует активации дцРНК-чувствительной киназы (протеинкиназа R [PKR]), также наблюдался в RC, как и вирусный промежуточный фактор транскрипции 3. Ядерные факторы, необходимые для транскрипции вирусного генома, также рекрутируются в эти сайты (18), как и клеточные G3BP и Caprin-1, которые, как известно, необходимы для промежуточной транскрипции вируса in vitro (15). Факторы инициации клеточной трансляции, эукариотический фактор инициации 4G (eIF4G) и eIF4E, а также рибосомы также присутствуют в вирусных RC; однако большой пул рибосом остается в цитоплазме, указывая на то, что предпочтительная трансляция вирусной мРНК может быть достигнута за счет секвестрирования факторов инициации.Трансляция вирусной мРНК происходит внутри вирусных RC, поскольку β-галактозидаза, экспрессируемая из рекомбинантного VV, была ограничена этими компартментами (15). Такая компартментализация факторов трансляции, с одной стороны, будет иметь значение для эффективной экспрессии вирусных генов, а с другой стороны, для одновременного подавления синтеза клеточного белка.

Во время поздней фазы инфекции, когда начинается сборка вируса, сайты репликации высвобождаются из rER, и серповидные мембраны связываются с вирусной ДНК, чтобы инициировать сложный процесс сборки (см. Ссылку 27).

Asfarviridae. Как и Poxviridae, ASFV, единственный член семейства Asfarviridae в настоящее время, реплицируется на вирусных фабриках, которые распределены в перинуклеарных цитоплазматических участках. Однако, в отличие от поксвирусов, ASFV не только рекрутирует ядерные факторы на эти фабрики, но также инициирует репликацию генома в ядре клетки (28–31). Считается, что короткие фрагменты ДНК-предшественника впоследствии экспортируются из ядра в цитоплазматические РЦ, где они используются в качестве праймеров для репликации полноразмерного генома (30–32).Интересно, что цитоплазматический синтез ДНК не зависит от ядра (33). Учитывая его большой геном, считается, что вирус кодирует белки, которые активно транспортируют вирусный геном в ядро, а также факторы, которые направляют выход ДНК-предшественника в цитоплазму. В то время как два вирусных структурных белка, p37 и p14, могут быть вовлечены в процесс проникновения в ядро ​​(34), вирусный матричный белок p37, который проявляет ядерно-цитоплазматическую челночную активность, может запускать ядерный выход и транспорт ДНК-предшественника вируса в РЦ (34, 35).

При проникновении вируса и высвобождении вириона из эндосомно-лизосомальной системы в цитоплазму ядро ​​ASFV транспортируется в MTOC (36). Между тем, внутри вириона происходит транскрипция ранних генов и посттранскрипционная модификация мРНК; это обеспечивается упакованными белками, такими как вирусная РНК-полимераза, и, следовательно, не зависит от клеточных ферментов (37–41). Однако поздняя экспрессия генов зависит от репликации вирусной ДНК и ранних вирусных белков. Для синтеза ДНК геном вируса АЧС кодирует набор белков, ответственных за репликацию цитоплазматической ДНК, включая ДНК-полимеразу, топоизомеразу, геликазу, лигазу и ДНК-связывающие белки (42, 43).

ASFV вызывает серьезные изменения в организации инфицированной клетки. На ранней стадии ламины A / C фосфорилируются, и сеть ядерных мембран рядом с участками, где накапливается вновь синтезированная вирусная ДНК, разрушается (44). Компоненты ядрышка (B23) и спеклов сплайсинга (SC35) также перераспределяются внутри ядра, при этом индуцируется дефосфорилирование и деградация РНК-полимеразы II, что способствует нарушению клеточной транскрипции (44). Кроме того, ASFV вызывает отключение синтеза белка-хозяина за счет рекрутирования eIF и рибосом в RC (45).В более поздние моменты времени, когда вирусная ДНК накапливается в цитоплазматических фабриках, прилегающих к внешней ядерной мембране, сеть ламина A / C дополнительно разрушается и секвестрируется в ядерные и цитоплазматические очаги. Последние рекрутируются в РЦ вместе с другими компонентами ядерной мембраны (44). Подобно другим вирусам, цитоплазматические фабрики вируса АЧС сравнивали с агресомами, поскольку новые вирусные фабрики формируются в MTOC и окружаются виментином и привлекают клеточные шапероны, убиквитин, протеасомы и митохондрии.Кроме того, подобно агресомам, фабрики ASFV нуждаются в микротрубочках и моторных белках динеина для своего образования (36, 46).

Ранние сайты репликации вируса АЧС проявляются в виде точечных очагов внеядерной вирусной ДНК, в то время как структурные белки распространяются по цитоплазме. Позже эти белки активно транспортируются в MTOC через микротрубочки, где они сливаются с фабриками ASFV (47, 48). Интересно, что реорганизация микротрубочек, по-видимому, имеет решающее значение для репликации ДНК, а также для поздней транскрипции генов (46, 47, 49), предположительно за счет стабилизации вирусных RC и концентрации клеточных и вирусных белков, необходимых для репликации в MTOC (46, 47, 49).Дальнейшая реорганизация клеточных компонентов индуцируется по мере репликации и включает перемещение митохондрий и шаперонов, а также перераспределение мембран ER в RC, потерю trans -сети Гольджи и обширную реорганизацию цитоскелета (47, 50). –52). ASFV кодирует вирусный гомолог клеточных убиквитин-конъюгированных ферментов (UBC), что позволяет предположить, что ASFV может манипулировать убиквитин-опосредованными ответами клеток-хозяев или модификациями вирусов или белков-хозяев (53).

Подразделение поксвирусных фабрик позволяет разделить экспрессию вирусных генов и репликацию ДНК (15). Точно так же во время инфекции ASFV факторы инициации хозяина рекрутируются в вирусные RC, тогда как вирусная РНК и рибосомы хозяина локализуются на периферии фабрик (54).

Цикл репликации вируса АЧС в основном происходит на этих вирусных фабриках, которые сначала наблюдаются через 6-8 часов после заражения (p.i.). Во время продолжающейся инфекции аморфный и кольцевой мембранный материал, а также увеличивающееся количество незрелых и зрелых вирусных частиц накапливаются на фабриках вируса АЧС от 12 до 24 часов.я. и следовать сложному морфогенетическому процессу, аналогичному таковому для поксвирусов (см. ссылку 55).

Подобно поксвирусам и ASFV, другие члены остальных семейств NCLDV также образуют цитоплазматические фабрики, которые имеют много общих черт, описанных выше; однако геномы иридовирусов (56) и фикоднавирусов (57) первоначально перемещаются в ядро, где начинается репликация, тогда как репликация генома мимивирусов, по-видимому, полностью происходит в цитоплазме (6).

ЦЕНТРЫ РЕПЛИКАЦИИ ЯДЕРНЫХ ВИРУСОВ

Подобно NCLDV, ДНК-вирусы, которые реплицируются в ядре, используют агресомоподобные структуры в качестве сайтов для сборки ядерных фабрик. Однако ультраструктура и детальная архитектура сайтов репликации и сборки ядер не были изучены так подробно, как цитоплазматические фабрики. Накопленные доказательства и недавние биохимические исследования обнаружили множественные взаимодействия между вирусными геномами и RC с ядерными компонентами и доменами, а архитектура вирусных компартментов репликации была выявлена ​​с помощью различных флуоресцентных и электронных микроскопических исследований.

После интернализации вирусных частиц вирусные ядра транспортируются в MTOC с помощью клеточных динеиновых / динактиновых моторов, а вирусные геномы доставляются в ядро ​​путем разборки вирусного капсида в ядерной поре (см. Ссылки 5, 58, 59, стр. и 60).

Внутри ядра вирусные геномы колонизируют определенные ядерные участки, используя клеточные компоненты для обеспечения эффективной экспрессии и репликации вирусных генов. Эти так называемые центры репликации или компартменты (RC) часто образуются рядом с PML-NB, ядерными структурами, которые участвуют в репарации ДНК, регуляции транскрипции, клеточном старении, апоптозе и индуцированном интерфероном антивирусном состоянии.Основным структурным компонентом PML-NB является белок PML, также известный как TRIM19, член семейства трехчастных мотивов (TRIM), который функционирует как основной организатор PML-NB и регулирует транзит белка посредством SUMO-опосредованных белковых взаимодействий ( рассмотрено в ссылке 61). В большинстве случаев компоненты PML-NB нацелены на вирусные геномы как часть механизма клеточной защиты. Впоследствии клеточные факторы, перемещенные в эти сайты, либо используются вирусом для его репликации (ДНК Pol, РНК Pol, факторы транскрипции, посттранскрипционный процессинг и экспорт мРНК), либо ингибируются вирусом для предотвращения / контроля клеточной противовирусной защиты ( PML, p53, ATM, ATR, Daxx, STAT, факторы регуляции интерферона) (62–64) (рис.1; Таблица 1).

Ассоциация PML-NBs с ядерными агресомами обеспечивает связь RC с хранением, а также удалением (неправильно свернутых) белков (63, 65). В отличие от цитоплазматических реплицирующихся вирусов, которые собирают частицы потомства в тесной ассоциации с клеточными мембранами, вирионы ДНК-вирусов, реплицирующиеся в ядре, часто собираются в непосредственной близости от центров вирусной транскрипции и репликации ДНК, лишенных окружающей мембраны (1, 5).

Herpesviridae.При заражении разными членами семейства Herpesviridae формируются схожие центры репликации (рис. 1). Белки PML-NB рекрутируются в вирусный геном, и вирусные RC, содержащие родительский геном, образуют смежные с PML-NB. Однако RC создаются с помощью разных механизмов, как описано здесь, в частности, для вируса простого герпеса 1 (HSV-1) и цитомегаловируса человека (HCMV).

HSV-1 (альфа-герпесвирус). Вскоре после того, как геном HSV-1 попадает в ядро, активируется противовирусная защита клетки-хозяина, и компоненты PML-NB доставляются в сайты, связанные с родительским геномом (66–71).Рекрутирование PML, Sp100 и Daxx зависит от их мотивов взаимодействия с SUMO. Кроме того, в этих очагах, индуцированных HSV-1, обнаруживаются SUMOилированные белки, а также клеточная лигаза SUMO E3 PIAS2β. Так, недавно было высказано предположение, что клеточная защита от чужеродной ДНК регулируется путем SUMO (72). Вирусный регуляторный белок ICP0 колокализуется с этими очагами и индуцирует опосредованную протеасомами деградацию PML и Sp100, действуя как убиквитинлигаза E3 (73–77), что приводит к разрушению PML-NB.Интересно, что ICP0 специфически нацелен на SUMO-1-модифицированные формы белков PML-NB для протеасомной деградации (78-80). Продолжающаяся репликация требует рекрутирования различных вирусных и клеточных белков в вирус-индуцированные очаги, которые созревают до центров вирусной репликации (81–83). Как следует из названия, эти компартменты обеспечивают оптимальную среду для экспрессии вирусных генов, синтеза ДНК и сборки дочерних нуклеокапсидов (84, 85). Кроме того, агресомоподобные структуры образуются рядом с RC на ранней стадии инфицирования.Эти так называемые вирус-индуцированные обогащенные шапероном (VICE) домены содержат молекулярные шапероны, особенно член семейства шаперонов Hsp70 Hsc70 и протеасомы 20S, которые изолированы от диффузного ядерного распределения, а также убихинированные белки (86–89). Как молекулярные шапероны, так и протеасомная система убиквитина являются ключевыми компонентами контроля качества клеточного белка (PQC). Первоначально убиквитилирование клеточных белков (см. Ниже) во время вирусной инфекции приводит к образованию доменов VICE, дополнительной ядерной агресомоподобной структуры (86).Следовательно, клеточная система PQC, задействованная в этих структурах, может использоваться для различных процессов во время репликации HSV-1. Таким образом, молекулярные шапероны обеспечивают сборку и правильную укладку вирусных мультимерных белковых комплексов, включая каркас RC, комплекс геликаза / примаза и вирусные капсиды. Домены VICE дополнительно служат местами хранения структурных белков вирусного капсида, которые были сделаны в избытке по сравнению с белками, упакованными в капсиды. Таким образом, было высказано предположение, что домены VICE представляют собой сборки, которые формируются на поздних этапах инфицирования (90, 91).Экспрессия вирусного гена в ядерных РЦ начинается сразу после проникновения вирусного генома в ядро. Линейная ДНК является кольцевой, и продукты гена немедленного раннего (IE), раннего (E) и позднего (L) вируса экспрессируются последовательно. Активная экспрессия гена герпесвируса в РЦ требует транслокации вирусных белков ICP0, ICP4 и ICP27, а также РНК-полимеразы II в эти сайты (92, 93). Как ICP0, так и ICP4 стимулируют транскрипцию генов E и L, в результате чего ICP4 функционирует как главный активатор транскрипции и необходим для прогрессирования за пределы непосредственно-ранней фазы.Напротив, ICP27 опосредует экспорт большинства мРНК герпесвирусов, взаимодействуя с рецепторами экспорта клеток Tap / Nxf и Aly / Ref (94). Накопление вирусных белков и вирусной матричной ДНК, а также транслокация клеточных белков в RC обеспечивают эффективную экспрессию генов, а также репликацию вирусного генома. Среди герпесвирусных белков, связанных с RC, есть белок, связывающий одноцепочечную ДНК (оцДНК) ICP8, комплекс гетеротримерной геликазы / примазы и полимераза HSV-1.Кроме того, клеточные ДНК-полимеразы α и γ и топоизомераза II, а также белки репарации и рекомбинации ДНК рекрутируются в RC (82, 83, 95, 96).

Сборка вирионов потомства, включая образование капсидов и упаковку ДНК, — это строго регулируемый процесс, который происходит в ядерных РЦ (97, 98). Обычно в этот процесс вовлекаются белки, образующие внутренний каркас, на котором собирается оболочка капсида и впоследствии включается геном (99–101). После этого собранный нуклеокапсид покидает ядро ​​с помощью уникального механизма почкования через ядерную мембрану.Наконец, вирион транспортируется через секреторные транспортные везикулы к плазматической мембране и высвобождается при слиянии мембран (102).

Общими чертами ДНК-вирусов являются образование убиквитинлигаз E3, как описано выше для HSV-1 ICP0, а также дерегуляция ответа на повреждение клеточной ДНК (DDR). Что наиболее интересно, как деградация клеточных белков, так и модуляция DDR в значительной степени связаны. Уже на ранней стадии инфекции HSV-1 белки, участвующие в гомологичной рекомбинации (HR) (83), а также в негомологичном концевом соединении (NHEJ) ДНК (95, 103), рекрутируются в вирусные RC.Интересно, что в отличие от аденовирусов, которые ингибируют этот внутренний противовирусный механизм (см. Ниже), клеточная DDR оказывается полезной для HSV-1. Тем не менее, HSV-1 также манипулирует DDR, инактивируя некоторые из его компонентов и используя другие. ICP0 вмешивается в оба пути DDR, вызывая деградацию различных белков-мишеней, в том числе каталитической субъединицы ДНК-зависимой протеинкиназы DNA-PK (104, 105), которая участвует в восприятии NHEJ, а также E3 лигазы RNF8 и RNF168 (106, 107), которые способствуют прикреплению ATM к участкам повреждения ДНК, т.е.е., чувствительный механизм ЧСС. Напротив, комплекс Mre11-Rad50-Nbs1 (MRN), а также активация киназы ATM, оба из которых участвуют в NHEJ, по-видимому, полезны для репликации HSV-1 (103). Интересно, что хотя фосфорилированный репликационный белок A (RPA) исключен из RC и секвестрирован в соседние домены VICE, тем самым предотвращая нормальную передачу сигналов ATR (108), ATR и ATRIP локализуются в RC и, как было показано, способствуют репликации HSV-1 (73 ).

HCMV (бета-герпесвирус).Центры репликации цитомегаловирусов человека образуются рядом с PML-NB. Различные исследования показали, что привлечение белков PML к вирусному нуклеокапсиду вскоре после его доставки в ядро ​​является частью противовирусной защиты хозяина. Однако впоследствии этому препятствуют различные белки HCMV. Репрессор клеточной транскрипции Daxx ингибирует экспрессию гена HCMV от главного промотора IE. Это обходит вирусный белок-тегумент pp71 (109–111). Интересно, что pp71 стимулирует протеасомную деградацию Daxx по механизму, который не зависит от функционального пути убиквитина (112).Кроме того, было обнаружено, что pp71 запускает Daxx SUMOylation, хотя до сих пор не было описано никакой функции для этой модификации (113). Кроме того, вирусный трансактиватор IE1 колокализуется с PML-NB и разрушает эти структуры (114), вмешиваясь в SUMO-модификацию PML (115). Таким образом, как pp71, так и IE1 взаимодействуют в разрушении клеточных PML-NB и противодействуют защитным механизмам хозяина. Кроме того, исследования этих белков HCMV выявили связь с клеточным путем SUMOylation, как это наблюдалось для других ДНК-вирусов.В соответствии с этими эффектами на клеточные PML-NB, было обнаружено, что подавление Daxx и / или PML, а также компонента Sp100 PML-NB усиливает репликацию вируса (116–119). Более того, киназа HCMV pUL97, по-видимому, является дополнительным вирусным белком, который препятствует функции PML. pUL97 ингибирует образование комплекса между PML и белком ретинобластомы (Rb) путем гиперфосфорилирования Rb (120, 121). Интересно, что киназная активность pUL97 также подавляет образование ядерных агресом (121).В отличие от вирусного протеина тегумента pp65, который вызывает несоответствующую агрегацию и секвестрацию вирусного тегумента и белков капсида, pUL97 предотвращает этот нежелательный эффект. Таким образом, предполагается, что pUL97 играет важную роль в сборке потомства вируса.

Подобно HSV-1, HCMV экспрессирует свои гены в каскаде, регулируемом во времени, с циклом репликации, разделенным на IE, E и L фазы. Ранние ранние белки IE1 и IE2 стимулируют экспрессию вирусных генов E и L, при этом IE2 является движущей силой репликации HCMV в целом.Как и следовало ожидать, РНК Pol II и факторы сплайсинга совместно локализуются с генами IE в RC (122). В то время как IE2 колокализуется с вирусными RC, взаимодействуя с вирусным геномом, локализация IE1 в PML-NB, как сообщается, зависит от взаимодействия с PML (123).

Недавно было сообщено, что для эффективной репликации вируса необходимы активные клеточные протеасомы (124–126). Инфекция HCMV, в частности, приводит к усилению активности протеасомного пути. Кроме того, активная репликация вирусной ДНК индуцирует рекрутирование протеасом на периферию вирусных RC, где имеет место активная транскрипция РНК.Это согласуется с наблюдением, что клеточный протеасомный путь используется для усиления ранней и поздней экспрессии генов (127).

Уже на ранней стадии инфицирования HCMV белки UL112-113 локализуются вместе с IE2 в пререпликационных очагах и обнаруживаются в RC на протяжении всего жизненного цикла вируса (128–130). UL112-113 кодирует четыре фосфопротеина, которые, как предполагается, привлекают белки, участвующие в репликации ДНК, в вирусные РЦ (128, 131). Эти коровые белки репликации вируса включают ДНК-полимеразу UL54, ассоциированный с полимеразой фактор процессивности UL44 и связывающий оцДНК белок UL57, а также гетеротример, состоящий из ДНК-геликазы UL105, примазы UL70 и ассоциированного с примазой фактора (132 , 133).При входе в ядро ​​геном HCMV превращается в кольцевую форму, и механизм репликации по методу катящегося круга дает конкатемеры на поздних этапах инфицирования (136, 135). Субъединица терминазы HCMV pUL56 потенциально связывает репликацию ДНК с упаковкой. Интересно, что этот белок участвует в расщеплении и упаковке вирусных геномов потомства (136), а также локализуется в вирусных RC (137).

Как описано для HSV-1, ДНК-вирусы часто мешают работе клеточного механизма DDR. Инфекция HCMV вызывает накопление опухолевого супрессора p53 (138–140).Одновременно вирус ставит под угрозу способность p53 трансактивировать нижестоящие клеточные мишени (138, 140–142). Таким образом, HCMV может использовать функции p53 для полной активации инфицированных клеток, параллельно подавляя его способность регулировать DDR, а также апоптоз. Интересно, что и p53, и RPA перемещаются в вирусные РЦ (143). Следовательно, возможно, что оба клеточных белка используются для помощи в контроле повреждения вирусной ДНК и / или для обеспечения эффективного синтеза вирусной ДНК, как сообщалось для других ДНК-вирусов (144–146).

Другие герпесвирусы. Интересно, что, помимо HSV-1 и HCMV, различные герпесвирусы противодействуют противовирусным свойствам PML-NB и приводят к разрушению этих тел и / или перемещению определенных компонентов PML-NB. Таким образом, члены семейства гаммагерпесвирусов, такие как вирус герпеса, связанный с саркомой Капоши (KSHV) (147), вирус герпеса саймири (HVS) (148) и вирус Эпштейна-Барра (EBV) (152), экспрессируют белки со свойствами, аналогичными HSV 1 ICP0. Кроме того, компартменты вирусной репликации развиваются вместе с остатками PML-NB (147, 148, 152).

Для KSHV было показано, что вскоре после заражения компоненты PML-NB локализуются в вирусных геномах и компартментах до репликации (147). Интересно, что PML представляет собой SUMO-2, модифицированный LANA2, ядерным антигеном 2, связанным с латентностью. Поскольку было описано, что модификация PML SUMO-2/3 индуцирует деградацию PML посредством убиквитинирования клеточной убиквитинлигазой RNF4 (150), эта модификация наиболее вероятно, приводит к опосредованной протеасомами деградации PML и, следовательно, к разрушению PML-NB. Таким образом, LANA2, по-видимому, мешает PML-опосредованной репрессии транскрипции (151).Репликация ДНК во время литического цикла инфекции KSHV требует шести вирусных белков, включая связывающий оцДНК белок Orf6, фактор процессивности полимеразы Orf59 и полимеразу Orf9, а также трехчастный субкомплекс примаза / геликаза. Интересно, что временная котрансфекция этих факторов приводит к образованию ядерных структур, напоминающих компартменты репликации. Более того, эти псевдо-RC окружены PML-NB (147).

Как упоминалось выше, HVS также противодействует опосредованной PML-NB внутренней защите клетки-хозяина.В частности, белок-тегумент HVS Orf3 индуцирует деградацию компонента Sp100 PML-NB, тогда как распределение и / или функциональность PML и Daxx остается неизменной. Хотя ПМЛ ограничивает репликацию HVS, она может играть важную роль в установлении латентной инфекции (148).

Герпесвирусы могут вызывать как латентную, так и литическую инфекцию клетки-хозяина. Во время латентного периода EBV PML-NB остаются интактными, и репликация вируса не связана с этими ядерными структурами.Однако переключение от латентной к литической репликации EBV немедленно нарушает PML-NB за счет диспергирования Sp100, Daxx и NDP55. Напротив, PML распространяется только после начала литической репликации (149). Для разрушения PML-NB достаточно одного предраннего белка EBV BZLF. Интересно, что BZLF конкурирует с PML за свободный SUMO-1, что приводит к уменьшению PML, модифицированного SUMO-1 (152). Кроме того, EBV экспрессирует белок тегумента, который специфически нацелен на внутреннюю защиту клетки-хозяина, тем самым активируя транскрипцию вирусного раннего гена.Этот белок, BNRF1, разрушает клеточный комплекс ремоделирования хроматина Daxx-ATRX, который, по-видимому, необходим для перехода от латентной инфекции к литической путем изменения вирусного хроматина (153). Дополнительные белки, локализующиеся в компартментах репликации и взаимодействующие с фактором процессивности ДНК-полимеразы EBV BMRF1, включают ядерный антиген пролиферирующих клеток (PCNA) и фактор репликации C (RFC), а также несколько белков системы репарации клеточного несоответствия. Таким образом, EBV может предотвращать события рекомбинации между гомологичными участками в его геномных последовательностях (154).Интересно, что активная репликация ДНК EBV индуцирует ATM-опосредованную DDR (155), которая модифицируется вирусной киназой BGLF4. В конечном итоге это приводит к оптимальной среде для амплификации вирусного генома, в то время как синтез ДНК клетки-хозяина блокируется (156, 157).

Подобно HSV-1, белок Orf61 вируса ветряной оспы (VZV), гомолог HSV-1 ICP0, разрушает клеточные PML-NB. SUMO-взаимодействующие мотивы (SIM), присутствующие в Orf61, критичны как для взаимодействия, так и для распространения этих ядерных структур (158).Трехмерная (3D) реконструкция с использованием сканирующей электронной микроскопии с последовательными срезами подтвердила, что PML-NB разбираются при взаимодействии Orf61 SIM с PML, и показала, что капсиды VZV захватываются в большие клетки PML (159).

В совокупности репликация вирусов герпеса происходит рядом с ядерными тельцами клеточного PML, которые, как известно, отрицательно ограничивают репликацию вируса. Интересно, что герпесвирусы выработали различные механизмы противодействия функции PML-NB.Следовательно, наиболее вероятно, что разные герпесвирусы нацелены на аналогичные клеточные пути, включая DDR, ремоделирование хроматина, контроль клеточного цикла и механизм транскрипции, чтобы способствовать их репликации. На данный момент эти механизмы лучше всего изучены для HSV-1 и HCMV; однако недавние результаты позволили получить первые подробные сведения о репликации других членов Herpesviridae.

Adenoviridae. При инфицировании клетки аденовирусные (Ad) частицы транспортируются к MTOC и разбираются в ядерной поре.Сразу после того, как вирусный геном попадает в ядро, он становится мишенью для репрессивного аппарата клетки-хозяина. Компоненты PML-NB, такие как Daxx, тем самым опосредуют репрессию транскрипции генома Ad, в частности, предраннего промотора E1A (см. Ссылки 64 и 68). Интересно, что этому противодействует капсидный белок VI, который входит в ядро ​​вместе с геномом Ad (160). В ходе аденовирусной инфекции Daxx подвергается протеасомной деградации ранним белком E1B-55K (161).

Другой ранний белок, E4orf3, связывается с ядерными тельцами PML и вызывает их разрушение из пунктированных фокусов в трековые структуры (162, 163). В частности, PML, Sp100, Daxx, SUMO-1 и TIF1α перемещаются на эти треки с помощью E4orf3 (163–166), которые могут напоминать ядерные агресомы (167). Эти PML-содержащие структуры впоследствии локализуются рядом с вирусными RC. Таким образом, противовирусный ответ подавляется, тогда как определенные компоненты этих ядерных телец могут использоваться вирусом для эффективной репликации (162, 163).

Помимо интерферон-зависимой противовирусной защиты, опосредованной компонентами PML-NB, E4orf3 нацелен на сенсорный комплекс ДНК Mre11-Rad50-Nbs1 (MRN) в треки (168). В конечном итоге комплекс MRN перераспределяется в цитоплазматические агресомы с помощью E4orf3 (169). Более того, Mre11 и другие клеточные белки убиквитинируются E1B-55K и E4orf6, которые собирают Cullin-зависимый E3 ubiquitin ligase комплекс и, таким образом, белки-мишени для протеасомной деградации (обзор в ссылке 170).Помимо Mre11, другие белки ответа на повреждение клеточной ДНК, включая ДНК-лигазу IV и геликазу Блума (BLM), подвергаются комплексной деградации E1B-55K / E4orf6 для предотвращения конкатенации вирусных геномов дцДНК, опосредованной этим путем (168, 171, 172).

Другим целевым белком комплекса убиквитин-лигазы Е3 является белок-супрессор опухоли p53. На ранней стадии экспрессии p53 индуцируется E1A (см. Ниже). Поскольку p53 трансактивирует несколько нижестоящих белков, индукция p53 с помощью E1A является сильно проапоптотической (173).Помимо белков клетки-хозяина, таких как опухолевый супрессор p53, E1A также активирует транскрипцию вирусных ранних генов. Оба опосредуются исключительным связыванием E1A с опухолевым супрессором ретинобластомы (pRB) (174–177). Это приводит к диссоциации pRB от фактора транскрипции E2F и, как следствие, к конститутивной активации E2F-чувствительных клеток и вирусного раннего промотора E2 (178, 179). Таким образом, E1A экономично индуцирует развитие клеточного цикла, а также экспрессию вирусных белков, необходимых для репликации вирусной ДНК.

Переход к поздней фазе Ad-инфекции отмечен началом репликации генома и последующей экспрессией генов из основной единицы поздней транскрипции (MLTU). Это переключение совпадает с образованием вирусных RC (180) и дальнейшей реорганизацией ядерных телец (181–185). Репликация аденовирусной ДНК инициируется уникальным механизмом прайминга, который включает праймер вирусного белка, концевой белок (TP), и осуществляется вирусной ДНК-полимеразой E2B. Кроме того, вирусные и клеточные белки, участвующие в репликации ДНК клетки-хозяина, привлекаются к участкам синтеза вирусной ДНК (186, 187).Продукты одноцепочечной ДНК связаны со связывающим белком оцДНК (DBP) и образуют ядерные включения, которые различаются по размеру и выглядят как полумесяцы или сферы (180, 185). Вокруг этих сайтов накопления оцДНК находится периферическая репликативная зона, где имеют место как репликация, так и транскрипция. Пунктатные сайты активной репликации расположены в виде кольца, окружающего оцДНК. Реплицированная дцДНК, однако, перемещается из этих фокусов репликации на периферию, где она служит матрицей для транскрипции вирусных поздних генов (185).Активная транскрипция приводит к образованию кольцевой зоны транскрипции и сплайсинга, окружающей оцДНК и фокусы репликации (188). Эта зона содержит дцДНК и зарождающуюся вирусную РНК, а также факторы транскрипции и сплайсинга. Эти факторы, которые играют важную роль в усилении экспрессии гена Ad, рекрутируются из CB, которые постепенно разрушаются во время поздней фазы, и центры репликации сливаются, поскольку они занимают области межхроматиновых гранул (181, 183, 185, 189, 191).

Транскрипция и сплайсинг, с другой стороны, тесно связаны с преимущественным экспортом транскриптов Ad на поздней фазе инфекции.Продолжающаяся репликация Ad приводит к концентрации факторов сплайсинга и вирусной РНК в межхроматиновых гранулах, которые постепенно становятся больше (182, 190). Это может улучшить процессинг или транспортировку, а также транспорт РНК. Предпочтительный экспорт поздних транскриптов Ad опосредуется ранними белками Ad E1B-55K и E4orf6. Интересно, что оба белка присутствуют в вирусных РЦ (191). Однако лежащий в основе механизм все еще неясен, хотя недавние результаты указывают на разные сценарии.Во-первых, активность комплекса убиквитин-лигазы E3 необходима для эффективного экспорта (189, 192). Поскольку во время репликации Ad транспорт основной клеточной мРНК одновременно блокируется (193, 194), вероятно, что один или несколько белков, участвующих в их экспорте, нацелены на протеасомную деградацию, которая, в свою очередь, может способствовать преимущественному экспорту вирусных транскриптов. Во-вторых, дальнейшие исследования подтвердили, что рецептор клеточного экспорта основной клеточной мРНК, TAP / NXF1, участвует в экспорте транскриптов Ad late (195).Интересная гипотеза состоит в том, что факторы клеточного экспорта перемещаются в центры вирусной транскрипции и репликации и, таким образом, способствуют эффективному экспорту вновь транскрибируемых мРНК из ядра. Одновременно эти белки будут истощены в остальной части ядерного компартмента, что также может объяснить блокировку клеточного транспорта мРНК. Однако это относится только к поздней фазе заражения, когда образуются РЦ. На ранней стадии Ad использует CRM1-зависимый путь экспорта для своих транскриптов (196).

Подобно Herpesviridae, центры репликации Ad образуются рядом с PML-NB и поэтому, вероятно, как противодействуют PML-зависимой противовирусной активности, так и получают выгоду от компонентов и каркаса из PML-NB. Интересно, что белки E1B-55K и E4orf3, как известно, участвуют в SUMOylation клеточных субстратов (197, 198), и оба связываются с PML-NB (199).

Parvoviridae. Члены семейства Parvoviridae отличаются некоторыми интересными аспектами от других вирусов, размножающихся у позвоночных.В отличие от ДНК-опухолевых вирусов, парвовирусы не способны индуцировать вступление в S-фазу клетки-хозяина; скорее, вирус остается неактивным, пока сама клетка-хозяин не переходит в S-фазу. Кроме того, парвовирусы, инфицирующие позвоночных, можно разделить на две группы: автономно реплицирующиеся вирусы и вирусы, которые зависят от коинфекции вспомогательного вируса и поэтому классифицируются как зависимые вирусы (200).

Аденоассоциированные вирусы. К роду Dependovirus относятся так называемые аденоассоциированные вирусы (AAV), которые были впервые описаны как требующие коинфекции аденовирусом (201, 202).Совсем недавно вирусы HSV-1 и -2, ЦМВ и псевдобешенство были идентифицированы как вспомогательные вирусы (203–206). В отсутствие вируса-помощника геном AAV интегрируется в геном клетки-хозяина (207, 208). Однако в случае заражения таких латентно инфицированных клеток вирусом-помощником экспрессия гена AAV реактивируется и цикл репликации прогрессирует (209).

AAV содержат две открытые рамки считывания, которые кодируют четыре неструктурных (Rep) и три структурных (Cap) белка (210–212), а также недавно идентифицированный белок, участвующий в сборке капсида, белок, связанный со сборкой AAP (213).Известно, что Rep78 и Rep68 играют ключевую роль во время амплификации ДНК AAV (211, 212), тогда как Rep52 и Rep40, как предполагается, участвуют в упаковке ДНК (214, 215).

Кроме того, AAV использует вспомогательные вирусные, а также клеточные белки для собственной репликации. До сих пор аденовирусы наиболее широко изучались в контексте вспомогательного вируса AAV, и поэтому в основном будут обсуждаться здесь. Различные продукты ранних генов Ad, участвующие в регуляции различных процессов во время заражения Ad, необходимы для полноценного функционирования вируса-помощника Ad (208).Таким образом, Ad E1A усиливает транскрипцию обоих ранних генов Ad, а также генов Rep и Cap AAV (216) и активирует экспрессию клеточных генов, необходимую для входа в S-фазу и синтеза белков репликации ДНК (208). Кроме того, Ad-зависимая убиквитинлигаза E3 регулирует экспрессию гена AAV, скорее всего, облегчая транспорт мРНК и способствуя репликации ДНК AAV (217). Аденовирусный ДНК-связывающий белок DBP стимулирует экспрессию гена AAV и удлинение ДНК, а также образование частиц AAV (218, 219).Таким образом, DBP — единственный белок Ad, который, как предполагалось, непосредственно участвует в амплификации генома AAV (219), в отличие от праймера белка Ad и ДНК-полимеразы, которые оба незаменимы для репликации AAV.

Интересно, что AAV еще больше узурпирует компартменты репликации Ad для собственной репликации ДНК в PML-NB-ассоциированных RCs (220). Следовательно, геном AAV и белки Rep перемещаются в Ad RC (221). Для обеспечения амплификации ДНК AAV, помимо Ad DBP, в этих ядерных структурах также требуются клеточные компоненты, включая RPA, фактор репликации C (RFC), PCNA и ДНК-полимеразу δ (222, 223).Таким образом, коинфекция аденовирусом не только обеспечивает AAV необходимыми белками и факторами Ad, но также соответствующим образом перепрограммирует клетку-хозяин. Однако сборка вирионов потомства AAV не проводится в RC, а вместо этого происходит в ядрышке (213, 224).

Интересно, что функции клетки-хозяина могут компенсировать заражение вирусом-помощником при определенных условиях, которые вызывают клеточный стресс-ответ (225, 226). В соответствии с этим ответ на повреждение клеточной ДНК также индуцируется во время коинфекции Ad.Недавно два независимых исследования показали, что белки DDR активируются и частично перемещаются в RC, например, DNA-PK, фосфорилированный Nbs1, Ku70 / Ku86 и / или ATM (227, 228). Эксперименты по ингибированию показали, что существует четкая, но неясная потребность в клеточных белках DDR для стимулирования или ингибирования репликации AAV (227).

Автономные парвовирусы. В отличие от зависимых парвовирусов, автономные парвовирусы строго зависят от функций клетки-хозяина, особенно от перехода клетки в S-фазу (229, 230).Геном автономных парвовирусов состоит из двух транскрипционных единиц, кодирующих неструктурные белки NS1 и NS2 и капсидные белки VP1 и VP2 (231). NS1 представляет собой многофункциональный фосфопротеин, который действует как активатор транскрипции вирусных промоторов, а также как инициатор и геликаза в репликации парвовирусной ДНК (232–237). Кроме того, NS1 колокализуется с реплицирующейся вирусной ДНК в вирусных ядерных фокусах (238, 239).

Эти компартменты представляют собой центры репликации парвовирусов, называемые автономными PV-ассоциированными репликационными телами (APAR).Помимо NS1 и ДНК парвовируса, в этих телах накапливаются белки репликации клетки-хозяина, которые способствуют амплификации вирусного генома, такие как PCNA, RPA и RFC, а также ДНК-полимеразы α и δ (238–241). Интересно, что RC парвовирусов отличаются от любой выдающейся ядерной структуры, такой как PML-NB, ядрышки, спиральные тельца и / или крапчатые домены (238). Таким образом, парвовирус индуцирует образование новых структур в ядре клетки-хозяина и одновременно рекрутирует необходимые клеточные белки в эти компартменты.Накопление вирусной ДНК и компонентов капсида приводит к разрастанию этих РЦ, так как в конечном итоге они занимают большую часть ядра клетки-хозяина (242). На сегодняшний день собраны противоречивые данные о том, происходит ли сборка капсида в ядерном (224, 243, 244) или цитоплазматическом (245) компартменте. Кажется вероятным, что капсидный белок VP2 запускает цитоплазматическую сборку олигомеров VP1 / VP2 и, кроме того, опосредует ядерный импорт этих комплексов с помощью своего сигнала ядерного импорта. Последовательно вирусные капсиды могут собираться в ядерном компартменте (246).

Подобно AAV, миниатюрный вирус мышей (MVM), автономный парвовирус, недавно был описан как вызывающий устойчивый ответ на повреждение ДНК и использующий этот клеточный путь для собственной выгоды. Сенсорные белки DDR (Nbs1, Mre11, ATM, DNA-PKs и RPA) и сигнальные белки (γh3AX, Ku70 и Ku86) накапливаются в тельцах APAR в ответ на активную репликацию вирусной ДНК. Регулируемые вирусом модификации клеточного DDR включают протеасомозависимую деградацию Mre11 и, по-видимому, использование ATM, поскольку ингибиторы этой киназы ограничивают репликацию MVM.В отличие от AAV, передача сигналов DDR в инфицированных MVM клетках опосредуется этой киназой ATM (247).

Polyomaviridae Связывание факторов клеточной транскрипции с полиомавирусным геномом опосредует его импорт в ядро. Впоследствии геном доставляется в определенные ядерные сайты, а именно в PML-NB (248).

В ходе жизненного цикла вируса различные вирусные и клеточные белки совместно локализуются с полиомавирусным (PyV) геномом на PML-NB (рис. 1). Эти факторы включают белки, участвующие в экспрессии генов и репликации ДНК, а также белки вирусного капсида.В целом это предполагает, что эти ядерные сайты могут быть важны для репликации PyV. Интересно, что исследования различных типов PyV нарисовали разные сценарии. Таким образом, отсутствие PML, основного структурного компонента PML-NB, либо не влияет на репликацию вируса, либо даже усиливает его (249, 250). В частности, вирусы BK (BKV), по-видимому, противодействуют функциям PML-NB путем драматической реорганизации этих структур и распространения двух его основных компонентов: Sp100 и Daxx (249). Напротив, хотя PML ограничивает репликацию вируса JC, этот вирус не модулирует напрямую PML-NB (250).Точно так же обезьяний вирус 40 (SV40) не перемещает компоненты PML-NB и не нарушает эти структуры. Интересно, что трансфекция большого вирусного Т-антигена TAg уже вызывает его локализацию в PML-NB. Таким образом, отложение вирусных RC на PML-NB, по-видимому, не только пассивный эффект, опосредованный PML-зависимым механизмом противовирусной защиты, но также PyV, по-видимому, активно индуцирует RC в этих сайтах (249, 250). Наиболее подробное исследование фабрик PyV было проведено недавно с использованием полиомавируса мышей, и исследователи показали, что, хотя RC PyV расположены рядом с PML-NB, создание этих центров, а также эффективный рост вируса не зависят от белка PML ( 251).

В целом репликация ДНК PyV локализована рядом с PML-NB (248, 249, 252, 253). Интересно, что экспрессия гена SV40 также имеет место в RC PyV на PML-NB. Однако пространственное ограничение PML-NBs учитывает только амплификацию ДНК, в то время как транскрипция, по-видимому, является косвенным следствием доставки генома к этим ядерным сайтам (254).

Одновременно с началом синтеза вирусной ДНК начинается поздняя транскрипция гена. После транскрипции поздних генов структурные белки VP1, VP2 и VP3 транспортируются в ядро ​​через их сигнал ядерной локализации (NLS) (255, 256, 257).Однако белки капсида импортируются не как мономеры, а как субъединицы капсида, особенно в виде пентамеров VP1 и комплексов VP2 / 3 (258). Поскольку было обнаружено, что большие TAg и VP1 совместно локализуются рядом с PML-NBs, было предложено пространственное соединение репликации ДНК и сборки капсида (248, 252, 253). Интересно, что Гарсеа и его коллеги установили новый и неожиданный механизм сборки вириона (251), который противоречит процессу сборки более крупных ДНК-вирусов, включая герпес- и аденовирусы, а именно инкапсидацию вирусного генома в предварительно сформированные капсиды (98, 259). ).Уже к 1980 г. была предложена полимеризация субъединиц капсида в вирусном геноме (260). Однако пентамеры VP1, по-видимому, сначала собирают трубчатые структуры, в которые интегрирован вирусный геном, и, наконец, икосаэдрические частицы вириона формируются по механизму почкования (251).

Подобно парвовирусам и папилломавирусам (см. Ниже), полиомавирусы активно рекрутируют клеточные белки DDR в RC и используют свои функции (261–264). В частности, PyV рекрутирует белки, участвующие в гомологичной рекомбинации, такие как киназа ATM и комплекс MRN (261, 263), и активирует эти пути (265).И релокализация, и активация важны для роста PyV (261–265). Интересно, что многофункциональный большой TAg индуцирует фокусы репликации, содержащие PML, и перемещает белки DDR в эти структуры, хотя было показано, что это не зависит от PML (251, 263). Подобно аденовирусам, Mre11 рекрутируется на сайты репликации SV40 и позже деградирует (263).

Papillomaviridae. По сравнению с Herpesviridae и Adenoviridae, мало что известно о продуктивной репликации вирусов папилломы, поскольку изучению этих вирусов мешает отсутствие соответствующей системы культивирования клеток.

Вирусы папилломы специфически инфицируют клетки плоского эпителия. Продуктивную репликацию вирусов папилломы можно разделить на раннюю и позднюю фазы, причем поздняя фаза, включая синтез вирусной ДНК, продукцию капсидных белков и сборку вирионов, ограничивается исключительно дифференцированными эпителиальными клетками. Вероятно, что при инфицировании транспорт генома к ядру регулируется капсидным белком L2 через взаимодействие с микротрубочками (266). Поскольку для транслокации и экспрессии ядерного генома необходимо деление клеток (267), вирусный геном может проникать в ядро ​​клетки только во время разрушения митотической мембраны.

Сравнимый с другими вирусами ядерной ДНК, геном вируса папилломы локализован в PML-NB (рис. 1). Любопытно, что эти ядерные структуры способствуют транскрипции папилломавируса (268), в отличие от большинства ДНК-вирусов, которые разработали механизмы противодействия рестриктивной функции PML-NB.

В общем, репликация вирусной ДНК достигается двумя ранними вирусными белками, E1 и E2 (269–272). В отличие от E2, который необходим только для инициации, E1 обладает активностью АТФазы и ДНК-геликазы, тем самым также запуская удлинение синтеза ДНК (273, 274).За исключением E1 и E2, остаточный аппарат инициации репликации, включая ДНК-полимеразу α / примазу, ДНК-полимеразу δ / PCNA, RPA и топоизомеразы I и II, обеспечивается клеткой-хозяином (275, 276).

Интересно, что, как и другие ДНК-вирусы, папилломавирус, похоже, также использует клеточную систему SUMOylation. Таким образом, E1 взаимодействует с клеточным SUMO-конъюгированным ферментом Ubc9, по-видимому, запуская модификацию SUMO-1 этого вирусного белка. Было показано, что эти функции важны для внутриядерного накопления белка, а также для эффективной репликации вирусного генома, зависящей от ориджина (277, 278).

Кроме того, репликация ДНК вируса папилломы тесно связана с ответом на повреждение клеточной ДНК. E1 и E2 активируют и перемещают клеточную DDR в вирусные RC. Нацеливание на клеточный DDR приводит к подавлению роста клетки-хозяина. В то время как E2 рекрутирует компоненты ATM DDR в вирусные RC, E1 специфически активирует этот клеточный путь ATM DDR (279). Как остановка роста, так и активация ATM зависят от АТФазной активности E1 и его связывания с вирусным ориджином репликации.Интересно, что клеточная DDR активируется для облегчения амплификации вирусной ДНК, тем самым стимулируя репликацию вируса папилломы (280).

Перед начальной экспрессией гена вирусный геном локализуется в PML-NB с помощью вирусного капсидного белка L2, поддерживающего транскрипцию ранних вирусных генов (268). Присутствие генома HPV в базальных клетках приводит к увеличению общего количества PML-NB, а также к повышению уровней посттрансляционно модифицированного белка PML (281). Онкобелок HPV E6, как было описано, колокализуется с PML-NB (282) и индуцирует протеасомную деградацию PML-IV, по-видимому, преодолевая рестриктивные функции этих ядерных телец (283).Интересно, что эти клеточные структуры также связаны с РЦ папилломавирусов (269, 284–288). Было высказано предположение, что L2 локализуется в PML-NBs, где он ассоциируется с E2 и рекрутирует вирусный геном в сайты сборки. Впоследствии L1 может быть рекрутирован в RCs для сборки вирионов потомства (268, 284). Хотя в различных исследованиях не наблюдается необходимости в PML-NB для репликации ДНК папилломавируса (281, 288), очевидно, что эти ядерные структуры реорганизуются с помощью L2 (289) и являются сайтами-мишенями для сборки вирионов.

Knox VillageSoup

Rockland — Бывший владелец несуществующей подрядной компании Castle Builders в Юнионе был обвинен большим жюри округа Нокс в том, что он украл почти 500 000 долларов путем обмана.

56-летний Малькольм Стюарт, который сейчас проживает в Пельцере, Южная Каролина, был обвинен 25 марта по двум пунктам обвинения в краже класса B путем обмана.

Судья выдал ордер на арест Стюарта и установил залог в размере 50 000 долларов наличными.

Один из графов утверждает, что Стюарт «намеренно создал впечатление, что он способен завершить строительные, ремонтные и ремонтные работы», хотя на самом деле он знал, что это впечатление было ложным.

Пятьдесят шесть жертв этой предполагаемой схемы были перечислены в обвинительном заключении с суммой краж на общую сумму 437 906 долларов.

Преступления предположительно произошли с апреля 2018 года по сентябрь 2019 года в округах Нокс, Хэнкок, Кеннебек, Линкольн и Сомерсет.

В другом обвинении утверждается, что Стюарт совершил кражу обманным путем, сказав паре, что не может завершить работу над своим проектом без ссуды. Он утверждал, что клиенты не платят ему, и у него проблемы с денежным потоком, но он сможет погасить ссуду.В обвинительном заключении говорится, что Стюарт знал, что не сможет выплатить ссуду.

В обвинительном заключении говорится, что в декабре 2019 года заем был на сумму более 10 000 долларов, но в пресс-релизе представительства AG говорится, что заем был на сумму 50 000 долларов.

Это первые уголовные обвинения, выдвинутые в связи с внезапным закрытием Castle Builders в сентябре 2019 года.

«Подрядчик, который сознательно побуждает потребителей платить ему деньги, не намереваясь оказывать обещанные услуги, совершает уголовное преступление», — заявил 25 марта в пресс-релизе генеральный прокурор штата Мэн Аарон Фрей.

«Получение денег обманным путем — это не просто плохой бизнес; это кража, и она напрямую вредит потребителям, которые во многих случаях экономили деньги на оплату этих услуг ».

Помимо объявления обвинительного заключения, генеральный прокурор Фрей призвал потребителей проявлять осторожность при найме подрядчиков по строительству домов.

«Мэн не лицензирует подрядчиков по строительству домов, поэтому потребители должны проявлять осторожность при найме подрядчика», — сказал Фрей.

«Спросите своих друзей и семью по именам людей, которые сделали для них хорошую работу. Проверьте рекомендации и проведите небольшое исследование, чтобы определить, заслуживает ли подрядчик репутация или у него много жалоб. Также прочтите главу 17 «Руководства по потребительскому праву » генерального прокурора , в которой содержится информация о законах штата Мэн, регулирующих контракты на строительство и ремонт домов, и о том, что вы можете сделать, если вас не устраивает работа подрядчика ».

Генеральная прокуратура штата Мэн уже подала гражданский иск против Стюарта и его жены Элизабет Стюарт и Castle Builders, обвинив их в обмане более 100 человек из более чем 1 миллиона долларов.

В октябре 2020 года суд назначил поверенного Августы Уолтера Макки в качестве нейтральной третьей стороны для ведения гражданского иска.

Помощник генерального прокурора Кэролин Силсби обратилась с просьбой о назначении нейтральной третьей стороны, заявив в судебных документах, что офис AG и Стюартс не смогли прийти к соглашению о посреднике или о процессе проведения альтернативного разрешения споров. В гражданских делах требуется альтернативное разрешение споров.

В июле 2020 года Стюарты подали в суд документы, утверждая, что они не могут заплатить свою долю посреднику.

«У нас нет средств, чтобы заплатить половине посредника, который стоит от 200 до 300 долларов в час». они заявили в своих судебных материалах.

Генеральный прокурор подает на пару в суд в соответствии с Законом штата о недобросовестной торговой практике, утверждая, что Стюарты нарушили этот закон по нескольким пунктам.

AG начало расследование после того, как клиенты подали многочисленные жалобы, некоторые до того, как пара закрыла свой контрактный бизнес в сентябре 2019 года.

Помимо гражданского иска штата, продолжается рассмотрение дела в суде США по делам о банкротстве.

Из

документов в суде США по делам о банкротстве штата Мэн Стюартс указывает, что у них есть иски против них на общую сумму 1 215 877 долларов. Это включает 165 234 долларов в виде налогов, причитающихся правительству.

В заявлении о банкротстве указано 177 кредиторов, большинство из которых являются бывшими клиентами Castle Builders. Бывшие рабочие, поставщики и правительство также указаны в качестве кредиторов.

Январское заявление о банкротстве, поданное офисом Maine AG, отказывается от своих требований в отношении любых денег, которые назначенный судом доверительный управляющий взыскал с кредиторов. По состоянию на январь этого года доверительный управляющий получил менее 50 000 долларов США.

Стюарты управляли Castle Builders почти три года, прежде чем внезапно закрыли его и свой магазин Agway в Юнион в сентябре 2019 года.

Затем пара переехала в Южную Каролину, чтобы жить к родственникам.

В гражданском иске утверждается, что Стюарты наняли людей для холодных звонков домовладельцам в попытке добиться бизнеса для Castle Builders.Затем Стюарты требовали авансовый платеж за работу перед началом работы и часто требовали второй авансовый платеж до того, как какая-либо работа была сделана.

По утверждению штата, большая часть их работ была неисправна, что привело к повреждению домов. Большая часть этого ущерба возникла из-за того, что недвижимость не была защищена от дождя и снега во время ремонтных работ. Кроме того, электромонтажные работы выполнялись работниками без лицензии и не соответствовали минимальным стандартам.

AG утверждает, что Стюарты нарушили закон о недобросовестной практике, потребовав и приняв более одной трети авансовых платежей на старте.Они также не смогли указать ожидаемое время начала и завершения работ, как того требует закон.

Запрос и получение второго аванса, когда работа не была сделана, было еще одним нарушением закона штата, согласно AG.

Неспособность Стюартов ответить на многочисленные жалобы клиентов на невыполненную работу также является нарушением, согласно иску.

Стюарты также не смогли заплатить субподрядчикам, из-за чего рабочие остались без денег, но также подвергли домовладельцев ответственности по долгам, утверждает AG.

Не удалось связаться с Малькольмом Стюартом для комментариев после предъявления обвинения. В суде нет защитника.

The Courier-Gazette связалась с Малкольмом Стюартом по телефону в ноябре 2019 года.

Он сказал, что о нем говорили много «неправды» и что его адвокат «работал над разрешением этого вопроса». Он отказался от дальнейших комментариев и не стал подробно рассказывать о том, что было сказано ложью.

Ответ Стюартов по гражданскому делу включает отклонения всех требований, поданных государством.